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目的:钼作为机体必需微量元素,在动物的生长发育和代谢过程中发挥着重要作用。巨噬细胞和脾淋巴细胞在非特异性免疫和特异性免疫中有重要作用。目前,国内外关于钼的报道主要集中于泌尿和生殖系统,而关于钼对体内、体外免疫细胞毒性作用的研究,尚未见报道。因此,本实验先以小鼠为研究材料,探讨钼对机体免疫功能的影响,再以小鼠巨噬细胞和脾淋巴细胞为对象,研究钼对两者免疫功能的影响。最终结合两方面的研究结果,阐明钼对小鼠细胞和机体免疫功能的影响。主要研究内容及结果如下: (一)钼对小鼠机体免疫功能的影响 实验选用30 dKM小鼠60只,随机分为4组,分别饮用钼水(mg/L),Ⅰ组(0)、Ⅱ组(400)、Ⅲ组(800)、Ⅳ组(1200),实验周期42 d,定期剖杀取样。分别采用HE法、化学比色法、ELISA法等,探讨钼对小鼠免疫功能的影响。结果如下:钼(≥800 mg/L)作用28 d及以上时,可引起小鼠脾脏指数及抗氧化功能降低,小鼠免疫球蛋白、抗炎细胞因子含量下降,促炎细胞因子含量下降;钼(≥800 mg/L)作用42 d时,小鼠脾脏发生组织学变化。 (二)钼对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响 本研究以体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞为材料,将钼酸钠分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组,使其终浓度为0、10、20、40、80、160 mg/L,培养24 h后,采用显微镜、ELISA、比色法,分别检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬、分泌、抗氧化功能的变化,来探讨钼对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。结果如下:10~20 mg/L的钼酸钠溶液作用24 h,可使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬、分泌功能增加,NO代谢和抗氧化功能无显著变化;钼(≥20 mg/L)可造成小鼠腹腔巨噬细胞吞噬、分泌、抗氧化功能降低,NO代谢增强。 (三)钼对小鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响 本研究以体外培养的小鼠脾淋巴细胞为材料,将钼酸钠分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组,使其终浓度为0、10、20、40、80、160 mg/L,培养24 h后,采用CCK-8、ELISA、比色法、单细胞凝胶电泳法,分别检测小鼠脾淋巴细胞活性、分泌、抗氧化、DNA损伤情况,来探讨钼对体外小鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响。结果如下:10~40 mg/L的钼酸钠溶液作用24 h,可使小鼠脾淋巴细胞活性、分泌功能增加,NO代谢和抗氧化功能无显著变化;钼(≥40 mg/L)可造成小白鼠脾淋巴细胞活性、分泌、抗氧化功能的降低, NO代谢、DNA损伤增强。 结论:本实验从钼对小鼠机体、巨噬细胞、脾淋巴细胞免疫功能的影响,初步探讨了钼对体内、体外免疫细胞的毒性作用,证实了钼具有双向调节作用,低剂量钼能够促进免疫细胞的免疫功能,高剂量钼能够损伤免疫细胞的免疫功能。