明睛颗粒对骨髓来源细胞参与脉络膜新生血管形成的干预作用研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:yuanlaiyizhizailiula
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察明睛颗粒对激光诱发脉络膜新生血管(CNV)后对骨髓来源细胞动员,及在脉络膜新生血管趋化和黏附、分化的影响,探讨明睛颗粒对骨髓来源细胞参与脉络膜新生血管形成的干预作用。方法:1.将氪激光诱导脉络膜新生血管的C57BL/6小鼠随机分为治疗组和模型对照组,以正常小鼠作正常对照组。采用流式细胞仪检测小鼠在治疗后7d、14d、28d外周血的CD34+细胞百分数,ELISA方法检测外周血粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、血管生长因子(VEGF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血小板反应蛋-1(TSP-1)、血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)的含量。2.采用氪激光诱导C57BL/6小鼠脉络膜新生血管发生,激光后给予尾静脉注射GFP小鼠的骨髓细胞,随后将小鼠随机分为治疗组和对照组,治疗组小鼠予以明睛颗粒溶剂每日灌胃,对照组予以蒸馏水灌胃。分别在在治疗后7天,14天及28天,采用脉络膜铺片观察脉络膜新生血管及移植骨髓细胞在脉络膜新生血管处归巢情况,光镜观察小鼠视网膜脉络膜组织病理改变,用眼底荧光血管造影在治疗后28天观察脉络膜新生血管情况。ELISA检测小鼠外周血基质细胞衍生因子1α (SDF-1α)、趋化因子受体4(CXCR4)的含量,免疫荧光法观察基质细胞衍生因子一-1(SDF-1α)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)在CNV区域的表达,RT-PCR观察眼部VEGF的表达。3.采用氪激光诱导C57BL/6小鼠脉络膜新生血管发生,激光后给予尾静脉注射GFP小鼠的骨髓细胞,随后将小鼠随机分为治疗组和对照组,治疗组小鼠予以明睛颗粒溶剂每日灌胃,对照组予以蒸馏水灌胃。分别在在治疗后7天,14天,免疫荧光双染法观察CNV区域的GFP, CD31, α-SMA, F4/80, RPE65表达情况,观察明睛颗粒对CNV中BMCs分化的影响。结果:1.治疗后7d、14d,模型对照组外周血CD34+细胞数明显高于治疗组及正常组(P<0.05),治疗组和正常组差异无统计学意义(P>0.05);治疗组外周血GM-CSF及VEGF含量均明显低于模型对照组和正常组(P<0.05);治疗后7d对照组和治疗组外周血TSP-1含量均较空白组降低,且治疗组高于对照组(P<0.05)。2.小鼠实验眼光凝后,120只眼1060个激光点中,850个光斑中央有气泡生成(80.1%),正常无出血;治疗后第7天,14天,脉络膜铺片中显示治疗组CNV中骨髓来源细胞明显少于对照组,CNV面积亦较对照组小;光镜观察治疗组视网膜脉络膜病变程度较对照组明显减轻;治疗后第7天,ELISA检测发现治疗组外周血SDF-1、 CXCR4明显低于对照组(P<0.05);免疫荧光检测显示治疗后第7天、14天及28天治疗组CNV区域SDF-1α, ICAM-1, VCAM-1表达较对照组减弱。3.免疫荧光双标检测显示,CNV内BMCs也可分化为RPE细胞,血管内皮细胞,巨噬细胞,血管平滑肌细胞。治疗后第7天,第14天,治疗组CNV区域内GFP+细胞数明显低于对照组(P<0.05),治疗组GFP+细胞转化的CD31‘细胞数比对照组明显减少(P<0.05),治疗组RPE65+数细胞比对照组明显减少;治疗后第7天,治疗组中由GFP+细胞转化的F4/80+细胞数比对照组明显减少(P<0.05),但是这4种细胞与GFP+细胞构成比,即各细胞分化率比较无显著差异(P>0.05)。结论:初步显示明睛颗粒能在早期抑制CNV小鼠外周血骨髓干细胞的动员,并能在CNV形成早期减少外周血及CNV周围趋化因子和粘附因子的蛋白表达,抑制外周血骨髓干细胞在CNV处黏附和趋化,从而抑制新生血管。明睛颗粒可以使CNV区域内BMCs细胞减少,在早期能减少CNV区域内的RPE细胞、内皮细胞、巨噬细胞数,但是不能降低BMCs向内皮细胞、RPE细胞、巨噬细胞的分化率。
其他文献
为了揭示二连盆地脑木根凹陷下白垩统等时地层格架下的聚煤规律,利用钻孔资料分析了含煤岩系岩相组合特征、沉积相、层序地层特征,绘制了横纵向层序地层剖面及煤层厚度等值线
目的 :采用大鼠海马神经元作为研究对象 ,研究咪唑安定对神经元钠离子通道的影响 ,以探讨其临床遗忘作用的可能机制。方法 :在急性分离的大鼠海马锥体神经元上 ,利用全细胞膜
为了培育更加适应新时代发展要求的学生,大力提升公民思想政治素养,高校课程授课要坚持育人为先、学生为本的理念,在新时代开展课程思政重点把握理念引领、德业并进、价值凝
YB地区长兴期生物礁具有独特的平面分布形状,呈倒“W”状。其独特的生物礁带平面分布形态揭示了多种因素共同作用的结果,主要是古地理和海平面的升降变化造成。长兴期生物礁
通过分析“无边界”概念的内涵与外延,以川九路灾后重建项目为例,从生态补偿和交旅融合两方面提出了“无边界”概念下川九路灾后重建项目的景观设计,为重大工程受损后的生态
针对塔里木油田库车前陆盆地砂岩地层发育大量高倾角裂缝等特征,建立双孔介质油藏多分支垂直裂缝井渗流数学模型。对模型进行数值求解,绘制并分析裂缝参数对压力动态典型曲线的
Multiple access interference (MAI) and near-far problem are two major obstacles in DS-CDMA systems. Combining wavelet neural networks and two matched filters, t
伴随经济产业结构改革的提速,水稻种植业发生了翻天覆地的变化,从传统的小范围人工种植,逐渐转向机械化承包模式,无论对农业结构,还是对农业经济发展,都起到了积极的作用。但
中国式分权是导致我国工业粗放式增长的重要制度因素,财政分权和地方政府竞争在促进工业规模扩张的同时也降低了工业增长质量;财政分权还通过加强地方政府竞争,间接促进了工