苯胺用途广，危害大，对它的生物法处理潜力很大。在好氧菌中，苯胺双加氧酶基因簇是降解苯胺的关键基因，编码苯胺降解途径的第一个酶，负责将苯胺转化成为邻苯二酚。而邻苯二酚是一种重要的化工产品，用途广泛，需求量大，对其的生物法生产与许多传统方法相比具有更大的优势。 用实验室保存的一株能高效降解苯胺的不动杆菌ANA5构建了XbaⅠ完全酶切的基因文库，通过菌落原位杂交，结合功能筛选等方法从中筛选到了阳性克隆，经亚克隆测序拼接得到了完整的苯胺双加氧酶基因簇。序列分析表明该基因簇包含6个完整的ORF，有启动子特征序列，全序列与已报道的不动杆菌YAA的苯胺双加氧酶基因簇在氨基酸水平上有较高的同源性。经实验发现，该基因簇在连接于无启动子的pLAFR6载体上时表达效果较好，用此重组质粒构建了基因工程菌。经发酵条件优化，发现该工程菌在苯胺浓度0.5mg／mL，采用LB培养基，E．Coli DH5α为宿主菌，于37℃培养，接种量为3％的条件下，邻苯二酚产量在20h达到0.546mg／mL，底物分子水平转化率可达92.4％。