去卵巢小鼠泪腺中IL-17/IL23的表达与眼表损害的关系

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目的:建立去卵巢小鼠模型,观察性激素水平变化对小鼠心脏血和脾脏中Th17细胞数量以及泪腺中IL-17A、IL-23表达的影响。方法:昆明小鼠(30只)摘除双侧卵巢建立去卵巢模型,假手术组(30只)为对照组。分别于摘除卵巢术前、术后3m、6m时放射免疫分析法检测小鼠血清雌二醇、睾酮质量浓度。分别于术后1m、3m、6m时,HE染色观察泪腺细胞形态学变化,酚红棉线法、角膜荧光素钠染色进行眼表评估,流式细胞术法检测心脏血和脾脏中Th17细胞,免疫组织化学法、ELISA、实时荧光定量PCR检测泪腺中IL-17A、IL-23表达。结果:术后3m、6m时,实验组小鼠血清中雌二醇和睾酮水平明显低于对照组(p<0.01),泪腺中淋巴细胞浸润。术后1m、3m时两组小鼠均未见明显眼表改变,术后6m时实验组与对照组比较,泪液分泌量减少、角膜荧光染色评分增加(p<0.01)。两组心脏血Th17细胞数量比较,术后1m、3m时未见明显差异(P>0.05),术后6m时实验组明显高于对照组(P<0.05)。两组脾脏Th17细胞数量比较,术后1m时未见明显差异(P>0.05),术后3m和6m时实验组高于对照组(P<0.01)。免疫组化法和ELISA结果显示术后1m、3m、6m时,实验组泪腺中IL-17A的表达量高于对照组(p<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,术后1m时实验组泪腺中IL-17A mRNA的表达量与对照组无明显差异(p>0.05),IL-23mRNA的表达量高于对照组(p<0.05);术后3m、6m时,实验组泪腺中IL-17A、IL-23mRNA的表达量高于对照组(p<0.05)。免疫组化法结果显示术后1m、3m、6m时,实验组泪腺中IL-23表达量高于对照组(p<0.05)。结论:术后1m时,泪腺中IL-17A、IL-23的表达水平开始升高。术后3m时,去卵巢组性激素水平开始降低,脾脏中Th17细胞数量增加,但并未出现眼表损害表现。术后6m时,去卵巢组性激素水平继续下降,血液中Th17细胞数量开始增加,脾脏中Th17细胞数量、泪腺中IL-17A、IL-23的表达持续增加,并出现泪液分泌量减少、角膜荧光素钠染色阳性的眼表损害。
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