目的:进行兔ADSCs的分离、体外培养,并观察ADSCs的体外生长的特性及多向分化潜能,为骨组织工程的进一步研究做准备。方法:将取得的脂肪组织充分剪碎,消化、离心后,将细胞悬液置于培养皿中,在培养箱中培养,获得原代细胞,并进行传代培养,观察体外增殖能力。选取第3代细胞,进行成脂诱导,进行油红O染色。选取第3代ADSCs,加入成骨诱导培养基,并设置加入基础培养基的为阴性对照,进行ALP、茜素红、Von Kossa染色。通过免疫荧光和RT-PCR检测ALP、OPN、OCN和ONN的表达。结果:脂肪干细胞接种24h后,可见少数较大的细胞开始贴壁,为大而扁平的单层细胞。48h后大多数细胞贴壁,呈梭形,有粗大突起。5-7天后,细胞逐渐分裂、融合成单层。传代后细胞呈梭形,核居中。细胞生长曲线示在第3～7天细胞进入快速增殖期。成脂诱导后,油红O染色证实细胞内有脂滴形成。成骨诱导后进行ALP、茜素红、Von Kossa染色结果均为阳性,通过免疫荧光和RT-PCR检测,ALP、OPN、OCN和ONN均有表达。结论:利用原代细胞培养技术可成功地从兔脂肪组织中分离出目的细胞,并进行体外培养及传代。在诱导培养基作用下兔脂肪干细胞可分化为成骨细胞及成脂肪细胞。