大肠杆菌中乙醇生物合成途径的构建

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乙醇是一种具有重要战略意义的能源,在不可再生资源日渐耗尽枯竭和对燃料需求不断增多及人们对全球性能源危机和环境保护认识的不断深入的21世纪,利用生物技术和可再生资源(生物源)进行乙醇的工业生产,并以此作为石油能源的替代物成为各国的研究热点.该文通过基因工程技术在大肠杆菌中构建了一条乙醇生物合成途径.采用PCR扩增了运动发酵单孢菌Zymomonasmobilis的两个产乙醇的关键酶基因pdc和adhII,分别克隆到载体pUC19和pUC18中形成重组质粒pUC18:pdc、pUC19:adh.串联两个基因并插入到用EcoRI酶切的pUC18中构建载体pPA,转化大肠杆菌E.coliDH5α得到重组子.携带pPA的重组菌被证明具有丙酮酸脱羧酶酶活且提高了乙醇脱氢酶酶活.通过代谢工程在EscherichiaColi成功地构建了乙醇合成途径.
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