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背景：近年来，肺癌是发病率和致死率最高的恶性肿瘤，已成为严重影响人类健康的主要疾病。在工业发达国家，死于肺癌的患者人数占所有死亡人数总和的29%。我国肺癌发生率亦呈逐年上升的趋势，为各种癌症之最。由于肿瘤细胞的发生发展是由多种信号转导通路、多种癌基因、抑癌基因等机制共同介导的复杂过程，致使目前非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）与小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者的生存率极低。肺癌患者的治疗尽管采用了手术、放疗与化疗结合的综合治疗措施仍无明显疗效，因此我们从基因的角度阐明肺癌发生、发展的机制，并寻求有效的新的基因治疗的靶点有重要意义。RASSF10含有Ras效应器，是新近发现的RAS相关区域蛋白家族成员之一，RASSF10在一些肿瘤细胞中由于启动子甲基化而致表观基因频繁失活，发挥抑癌基因的功能来调控肿瘤的发生发展。在甲状腺癌、儿童急性淋巴细胞白血病、黑色素瘤、神经胶质瘤、前列腺癌以及胃癌中均有报道，但国内外对其在肺癌生物学功能的研究尚属空白。因此，本实验着手于研究RASSF10在肺腺癌SPCA-1细胞中的表达情况，采用基因转染的方法，应用RNA干扰技术，下调SPCA-1细胞中RASSF10的表达，探讨RASSF10在肺癌细胞中的作用机制。目的：观察基因转染后肺癌细胞的形态学变化，检测基因转染前后RASSF10在SPCA-1细胞中的表达情况，综合分析RASSF10在肺部恶性肿瘤发生中的作用机制，为肺癌的临床治疗提供新的理论依据。方法：本实验将设计合成的RASSF10干扰质粒通过脂质体（LipofectamineTM2000）瞬时转染入肺癌SPCA-1细胞系中，降低RASSF10在肺腺癌SPCA-1细胞系内的表达，应用荧光显微镜检测转染效率，观察转染后SPCA-1的细胞形态学变化，采用RT-PCR、免疫荧光技术、Western blot等分子生物学实验技术分别从mRNA与蛋白水平检测转染后对SPCA-1细胞内RASSF10表达水平的影响，应用CCK8、流式细胞技术分别检测转染后SPCA-1细胞系的增殖状况与凋亡率的变化。结果：倒置显微镜观察转染RASSF10干扰质粒前后SPCA-1细胞形态学的变化：转染前细胞贴壁生长，多为梭形，大小适中，细胞质饱满，核仁清晰。转染48h后，细胞核分裂增多，细胞数量增多，生长状况得到改善。RT-PCR检测RASSF10mRNA的表达，结果显示：转染RASSF10干扰质粒48h后，RASSF10的mRNA表达水平明显下降(P＜0.05)，而空白对照组及阴性乱序对照组其mRNA表达水平无明显变化（P＞0.05）。Western blot及免疫荧光检测结果显示：转染RASSF10干扰质粒48h后，干扰组细胞的RASSF10基因较空白对照组及阴性乱序质粒组其蛋白表达水平下降(P＜0.05)，而且还提示RASSF10是定位在SPCA-1细胞的胞膜表达。CCK8实验检测细胞增殖状况结果显示：在0h、48h、72h、96h四个时间点，RNA干扰组细胞吸光度值分别为0.31±0.003、0.62±0.010、1.05±0.024、1.44±0.018，正常对照组细胞吸光度值分别为0.30±0.021、0.49±0.012、0.75±0.031、1.17±0.014，组间比较经t检验分析差别有统计学意义（P＜0.05）。流式细胞技术检测细胞凋亡率变化，结果显示：转染48h后，实验组转染细胞凋亡率为（5.12±0.36）%，而空白对照组为（7.23±0.54）%，阴性对照组为（7.40±0.42）%，运用重复测量资料的方差分析，实验组与空白组及阴性对照组之间的差异比较均有统计学意义（P＜0.05），而空白组与阴性对照组经统计学分析无明显差异（P＞0.05）。实验结果表明，转染RASSF10干扰质粒后，可促进肺癌SPCA-1细胞的增殖，降低细胞凋亡率。结论：利用RNA干扰技术下调RASSF10基因的表达，结果显示可以促进肺癌SPCA-1细胞增殖，降低细胞凋亡率，阻遏细胞凋亡的进行，提示RASSF10在肺癌的发生中起着抑癌基因的作用。