第一部分盐酸加替沙星胶囊质量标准研究加替沙星(gatifloxqcin，AM-1155)是日本杏林株氏会社首创的新一代氟喹诺酮类抗菌药，它不仅弥补了环丙沙星、氧氟沙星等第三代喹诺酮类抗菌药对某些菌种抗菌活性弱的缺点，而且几乎没有潜在的光敏副反应。由于加替沙星所具有的广泛和高效的抗菌活性，所以受到国内外的广泛关注，极有可能成为临床上广泛应用于治疗各种感染性疾病的常用药物。 目前，河北奥特医药研究咨询公司等已成功合成盐酸加替沙星原料药，而我国尚无相关报道，所以对这一领域的探索和研究就变得十分重要，它将推动我国抗菌药物的发展。本文在对试制产品的理化常数、纯度检查、含量测定等方面进行研究的基础上，进一步制订出其制剂的质量标准，对于全面监控药品的质量，具有重要的现实意义。 目的：对盐酸加替沙星胶囊的理化特性进行研究，为制定本品质量标准奠定基础。 方法：1性状：观察本品三批样品的外观，对本品的性状进行描述。2鉴别：A采用化学方法，利用其分子结构中的叔胺基团可与丙二酸显色这一特性进行分析。B利用分子中的共轭结构，在紫外光区有特征吸收，采用紫外分光光度法，取本品内容物，用水制成5μg/ml的溶液，在200nm～400nm波长范围内进行光谱扫描，确定最大吸收。C采用高效液相色谱法，通过比较样品色谱峰与对照品色谱峰的保留时间进行分析。3确定有关物质色谱条件：选择检测波长，调整流动相的组成、配比、流速以使加替沙星色谱峰分离完全。4色谱系统适用性试验：调整色谱流动相使分离度、理论板数、不对称因子符合要求。5有关物质检查：用高效液相色谱法检查有关物质。6专属性试验：将供试品经高温、酸、碱、光照、氧化破坏性试验后，考察在拟定色谱条件下供试品与其降解产物分离的情况。7有关物质分析方法考察：分别进行稳定性、重现性试验，并确定最小检出量。8确定溶出度测定方法：选择溶出介质，确定检测波长、转速、取样点及辅料干扰实验。9溶出度分析方法考察：分别进行线性、稳定性、重复性、中间精密度和回收率试验。10溶出均一性试验：取盐酸加替沙星胶囊6粒，按溶出度测定方法测定每片在5、15、25、35、45、60min时的累积溶出率。11溶出度测定：照已确定的方法测定样品三批。12反相高效液相色谱法测定盐酸加替沙星胶囊的含量：分别进行线性、重现性及稳定性、重复性、中间精密度、回收率及辅料干扰实验，并进行含量测定。 结果：1性状：样品三批，除去囊壳，内容物为白色并带淡黄色粉末。2A样品三批，与丙二酸显色，均呈正反应，辅料无干扰。B盐酸加替沙星在288.9nm处有最大紫外吸收。C盐酸加替沙星供试品色谱峰的保留时间与对照品色谱峰保留时间一致。3确定色谱条件：色谱柱为DiamonsilTMC18色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)；流动相为0.01mol/l磷酸溶液-乙腈(80：20)；流速为1.0ml/min；检测波长为293nm。4色3000，保留时间为6.7min左右，与相邻色谱峰的分离度均大于1.5，不对称因子为1.05。5有关物质检查：用该法检查三批供试品的杂质含量，结果均在0.5％以下。6专属性试验：盐酸加替沙星对光稳定，耐氧化，盐酸加替沙星经高温、酸、碱破坏性试验后，其降解产物均能与主峰实现很好的分离。7有关物质分析方法考察：供试品在12h内稳定，重现性良好，最小检出量为6ng/ml。8确定溶出度测定方法：比较盐酸加替沙星在水和0.1mol/l盐酸中的溶解度，选用水作为溶出介质；取对照品水溶液在200～400nm波长处进行光谱扫描，在288.9nm波长处有最大吸收，故选290nm波长作为测定波长；转速：100r/min；取样时间：45分钟；在上述波长范围内辅料无干扰吸收。9溶出度分析方法考察：盐酸加替沙星对照品在浓度1.122～11.220μg/ml的范围内线性关系良好，回归方程为A=0.075799C-0.003374，相关系数r=0.9999(n=6)；供试品在8h内稳定，RSD为0.55％；重复性和中间精密度均良好；平均回收率为100.3％，RSD为0.36％。10溶出均一性试验：盐酸加替沙星胶囊供试品在25min时溶出达平衡点，但溶出的均一性不及45min，故溶出时间定为45min。11溶出度测定：供试品在45min的溶出量均大于80％。12反相高效液相色谱法测定盐酸加替沙星胶囊的含量：盐酸加替沙星对照品在浓度0.025～0.25mg/ml的范围内线性关系良好，回归方程为Y=1.43×107X+5.96×103，相关系数r=0.9999(n=6)；在12h内稳定，RSD为0.2％；重现性、重复性和精密度均良好；平均回收率为101.1％，RSD为0.27％；平均含量为100.8％，RSD为0.44％。；辅料不干扰实验。 实验。 结论：通过对盐酸加替沙星胶囊理化特性和含量测定等方面的研究，制定出盐酸加替沙星胶囊的质量标准。 第二部分盐酸加替沙星胶囊人体相对生物利用度研究目的：采用反相高效液相色谱——紫外检测法测定人血浆中加替沙星,以盐酸加替沙星片为参比制剂,研究盐酸加替沙星胶襄(受试制剂)的人体相对生物利用度,评价其生物等效性。 方法:1确定色谱条件:选择检测波长,调整流动相的组成、配比、流速以使加替沙星色谱峰与内标物质色谱峰分离完全。并进行方法专属性,线性，提取回收率，精密度与准确度及稳定的考察。2选择18名具有标准体生的健康志愿者,随机分为2组,分别口服单剂量的(400mg,以加替沙星计)盐酸加替沙星胶囊(T)和参比片剂(R)。2周后再交叉服药。采用确定的方法测定盐酸加替沙星经时过程的血药浓度。分别使用DAS(DrugAndStatistics,1.0版)程序包和SPSS程序包(11.5版)处理,采用方差分析和双单侧检验法评价两种制剂的生物等效性。 结果:1确定色谱条件:色谱柱为ZorbaxSB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流支相为乙腈-0.01mol/l磷酸二氢钾溶液(内含0.02mol/l三乙胺,用磷酸调节pH值至3.1)(18.5:81.5);检测波长为293nm;流速为1.0mL/min;柱温为25℃。内源性物质不干扰加替沙星的测定。血浆中加替沙星浓度在0.02～10.24μg/ml范围内线性关系良好,回归方程:Y=0.008338+1.607C,相关系数r=0.996(n=10),最低定量浓度为0.02μg/mL；平均提取回收率均大于66％；精密度及准确度均满足生物制品分析要求;样品在24小时内稳定。2不同受试者口服单剂量的T及R(400mg)后,血药浓度-时间数据经计算机处理,药代动力学特性符合-房室模型。受试制剂和参比制剂，血浆中加替沙星的Tmax分别为1.5±0.7h和1.5±0.6h；Cmax分别为4.29±0.72μg/ml和4.04±0.45μg/ml；AUC0-36h分别为：40.26±4.77μg/ml·h和37.89±4.09μg/ml·h；AUC0-∞分别为：41.69±5.20μg/ml·h和39.12±4.53μg/ml·h。两制剂的Cmax、AUC0-36和AUC0-∞经对数转换后进行方差分析和双单侧t检验，结果表明两制剂具有生物等效性；受试制剂的相对生物利用度(F=AUC0-36h,T/AUC0-36h,R×100％)为(106.3±6.6)％。 结论：盐酸加替沙星胶囊与盐酸加替沙星片具有生物等效性。