【摘 要】
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目的：
应用基因芯片来检测脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞的MicroRNA的表达情况,并初步筛选出特异表达的MicroKNA。
方法：
本实验分两个阶段:
第一阶段:选取两株
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目的：
应用基因芯片来检测脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞的MicroRNA的表达情况,并初步筛选出特异表达的MicroKNA。
方法：
本实验分两个阶段:
第一阶段:选取两株细胞分别为Jurkat细胞(T淋巴细胞白血病细胞)、CCRF-CEM细胞(人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞)。首先将两株细胞培养到成熟阶段,每种细胞接种四个培养皿,每种细胞其中两个培养皿加入1ug LPS进行药物刺激,另外两个培养皿作为空白对照,药物刺激8小时后,分别收集每个培养皿细胞,之后分别提取每个培养皿中细胞表达的RNA。
第二阶段:将提取到的RNA做芯片分析,得到每种细胞的microRNA的表达谱,并对比同种细胞LPS刺激与未刺激的microRNA的变化,找出刺激组与正常组表达有明显差异的microRNA。
结果：
1.芯片结果显示,Jurkat细胞株中LPS干预组与未干预组细胞株相比,未见表达有明显差异的microRNA。
2.芯片结果显示,CCRF-CEM细胞株中LPS干预组与未干预组相比,microRNA-7-1的表达下调明显,Log2(G2/G1)值为-0.41(p<0.05)；
结论：
通过LPS刺激体外培养CCRF-CEM和Jurkat细胞,初步筛选出可能参与调节淋巴细胞炎症免疫应答的microRNA。如:miR-7-1。
miR-7-1的在LPS刺激CCRF-CEM细胞后表现为下调,可能为淋巴细胞炎症免疫相关的microRNA。
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