目的:观察GPC对肝细胞内Ca²⁺浓度的影响作用与规律,为揭示GPC影响肝细胞增殖活性的功效提供理论依据。 方法: 一.体外实验: 1.正常肝细胞:将正常小鼠肝细胞悬液加入不同浓度的GPC,用Fura-2荧光法测定细胞内Ca²⁺浓度,用MTT法测定细胞增殖活性; 2.受损伤肝细胞:分别将不同浓度GPC、H₂O₂和乙醇加入到小鼠肝细胞悬液中,共同培养24h,并用上述方法测定细胞内Ca²⁺浓度和细胞增殖活性; 3.肝癌细胞:将人肝癌细胞加入不同浓度的GPC,共同培养24h,分别以上述方法测定肝癌细胞内Ca²⁺浓度和肝癌细胞增殖活性。 二.体内实验: 将小鼠随机分为正常对照组、GPC对照组、乙醇对照组和2个乙醇+GPC剂量组共5个组。经口灌胃给予不同剂量的GPC和乙醇,连续6天后取肝脏,以Fura-2荧光法、MTT法、免疫组织化学和图像分析等技术手段,测定肝细胞内Ca²⁺浓度、细胞增殖活性及Bcl-2和Bax蛋白表达水平等指标。 结果: 一.体外实验 1.正常肝细胞内Ca²⁺浓度和增殖活性分别为108.26±14.17nmol/L和0.320±0.016,50mg/LGPC组分别为149.44±11.18nmol/L和0.515±0.013,而100mg/LGPC组分别为176.46±19.36nmol/L和0.756±0.045,各组细胞内Ca²⁺浓度、细胞增殖活性之间的差异均具有显著性意义（P<0.05）。 2.H₂O₂对照组和乙醇对照组肝细胞内Ca²⁺浓度分别是正常对照组的4.59和6.13倍,但肝细胞增殖活性则均较正常对照组显著性降低（P<0.05）.H₂O₂+高剂量GPC组胞内Ca²⁺浓度和细胞增殖活性分别为151.53±13.46nmol/L和0.335±