n-HAP/PRGD/PDLLA复合膜的制备及性能研究

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聚乳酸是一种生物相容性好、生物可降解的聚合物。因其免疫原性低、生物相容性和机械性能好而广泛应用于制药学和其他医学领域。聚乳酸(PDLLA)的降解周期一般为几个月,因此多用在与其周期相当的领域,但是纯的PDLLA材料会存在以下缺点:(1)缺乏活性基团;(2)亲水性差,生物活性低;(3)降解产物的酸性引起局部炎症反应。为克服上述缺陷,研究者对PDLLA进行了大量的改性工作。马来酸酐(MAH)含有活性很高的酸酐键,易开环形成羧基;精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)多肽是一种氨基酸序列,它可以通过结合整联蛋白受体促进细胞的黏附;羟基磷灰石(HAP)具有好的生物相容性且降解产生碱性物质,能够中和PDLLA产生的部分酸性物质。本文以PDLLA为基质材料,分别进行MAH和RGD的接枝以及HAP的共混改性,并对制备的材料进行一系列的测试与分析。本文以高分子量的PDLLA为原料,过氧化二苯甲酰(BPO)为引发剂,与马来酸酐(MAH)在一定条件下进行自由基聚合,制得含有酸酐键的聚合物PLA-MA。在缩合剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和1-羟基苯并三唑(HOBt)的作用下将五肽(GRGDY)接枝到PLA-MA上,合成聚合物PRGD。采用硅烷偶联剂(KH-550)对纳米羟基磷灰石(n-HAP)进行改性。然后将PDLLA、PRGD和改性后的纳米羟基磷灰石进行溶剂挥发法混合形成3种复合膜材料。通过红外,13C核磁共振和热裂解气相色谱-质谱联用表征PLA-MA分子结构,结果证明MAH已成功接到PDLLA的侧链上,采用GPC测试PLA-MA分子量及分子量分布,表明随着MAH用量的增加,得到的PLA-MA的分子量越小。通过红外与氨基酸分析仪分别表征聚合物PRGD的结构和接枝的氨基酸含量,结果表明氨基酸的接枝摩尔含量为6.02~12.27μmol/g。采用XRD、SEM和TG对改性前后的纳米羟基磷灰石进行表征,结果显示改性成功。制备的复合材料亲水性、热稳定性以及力学性能良好。以PDLLA薄膜为对照组,对3种复合膜进行3个月的降解,测试降解过程中的pH值、失重率和材料表面形貌的变化,结果为:4种材料pH值在整体上都是下降的趋势,纯的PDLLA和PRGD/PDLLA是逐步下降的,12周时pH值为6.4,加入n-HAP的复合材料pH先降低后逐步趋于稳定,到6周时基本稳定在6.9左右。材料的失重率变化趋势是先快再缓后快,降解前期,n-HAP会溶解一部分,从薄膜上脱落下来,可以中和聚乳酸产生的酸性物质,因此前6周n-HAP/PRGD/PDLLA复合材料的失重率高于纯的PDLLA。由于酸性环境会导致PDLLA降解加快,所以6周以后,PDLLA的失重率要比复合材料的高。细胞毒性试验和粘附程度实验都说明了复合材料的生物相容性比单纯的PDLLA的好。根据细胞毒性数据的统计学分析可知,RGD多肽和n-HAP对细胞粘附性都有一定的促进作用,从培养时间上分析,短期内RGD多肽的促进作用稍强,长时间内则n-HAP的促进作用稍强。
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