辣椒是一种病害发生较为严重的重要茄科蔬菜,频繁的病害常常导致辣椒产量和品质的降低。培育与推广应用抗病品种是解决辣椒病害问题的根本技术对策,对辣椒抗病机制的阐明有利于辣椒抗病遗传改良有效技术策略的制订。大量的研究表明,病原菌等生物逆境及非生物逆境胁迫可激活植物对逆境的抗性,而WRKY、ERF、MYB、NAC等转录因子在防御反应的诱导中起重要的调节作用。分离、鉴定参与特定逆境胁迫应答的转录因子并开展其功能鉴定是揭示植物抗病及抗逆分子机制的重要途径。鉴于此,本研究从外源SA处理的辣椒叶片均一化cDNA文库中分离获得一个辣椒WRKY基因家族成员的全长cDNA,并对其结构、亚细胞定位、与W盒结合活性以及在不同逆境胁迫下的表达进行了初步分析,旨在为进一步分析其功能并探讨其在植物抗逆基因工程中的应用价值奠定基础。主要研究结果如下:1.克隆得到的CaWRKY经生物软件分析发现其编码一个相对分子质量为37KDa的蛋白,具有WRKY转录因子典型的WRKYGQK和C2HC锌指结构,并根据保守域的序列结构,将其归入第三组WRKY基因家族;2.运用基因枪介导的方式将构建好的CaWRKY与GFP融合表达质粒导入洋葱细胞,结果显示CaWRKY为核定位蛋白;3.构建CaWRKY的效应质粒与含W盒的报告质粒并将其共转入洋葱细胞中,利用质粒瞬时表达分析CaWRKY与W-box的结合特性,结果显示CaWRKY具有W-box结合特性;4.转录激活分析显示CaWRKY在其C端具有一个潜在的转录激活域;5.运用RT-PCR分析CaWRKY在辣椒中不同时期和不同组织的表达,结果表明,CaWRKY在根、茎、叶等各组织器官中都存在一定的表达量,而在成熟期的叶片中表达量最高;通过Real-time PCR分析了CaWRKY在各种非生物胁迫和生物胁迫下辣椒中的表达模式,结果表明,CaWRKY受高温、寒冷、机械损伤以及辣椒青枯菌诱导后上调表达,而在干旱、盐胁迫下表达变化量较为微弱;CaWRKY受MeJA、SA和乙烯利诱导表达,受NAA激素诱导后存在一个先下调后上调的表达模式;此外,ABA、活性氧H2O2对CaWRKY的诱导表达并不明显;6.构建CaWRKY的双子叶超表达载体,利用农杆菌介导方式将其转入烟草中,获得30株T0代转基因植株,其中22株经PCR检测为阳性转基因植株。综上所述,CaWRKY参与了辣椒对多种生物与非生物逆境的应答反应,对CaWRKY的研究能为辣椒的抗逆改良奠定理论基础。