阴道加德纳菌与细菌性阴道病相关性研究——分离培养、药敏试验、流行病学调查

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背景和目的阴道加德纳菌(Gardnerellavaginalis,GV)是一种革兰阴性小杆菌或变异的球样小杆菌,是1955年由Gardner和Dukes在一例排出灰白色恶臭分泌物的妇女阴道中发现的,并于1980年被命名为Gardnerellavaginalis。近年来研究发现,在细菌性阴道病(Bacterialvaginosis,BV)的微生物菌群中GV处于优势地位,含量明显高于其他非正常菌群。GV不仅可导致BV,而且还可引起多种疾病及并发症如:绒毛膜羊膜炎、输卵管炎、子宫内膜炎、子宫颈癌、子宫颈炎,妇女产后菌血症,膀胱炎等。此外,GV与沙眼衣原体、解脲支原体等常见病菌双重或多重感染也较多见。GV还能明显刺激人类免疫缺陷病毒(HIV)在单核—巨噬细胞系统、淋巴细胞中的表达,与HIV的传播率增高有关。 该菌可以通过性传播,但由于临床症状不典型,不易被发现,故在性活跃人群中高发,部分病情迁延不愈,对妇女健康及社会公共健康影响很大。因此探讨GV的培养方法及体外抗菌素活性研究就显得非常有临床意义。为此,本课题从GV的分离培养方法、药敏试验及其与BV相关性等方面进行研究,为临床检测及诊治提供依据。 方法(1)GV分离培养:将标本接种在BBC血培养皿上,置37℃5%CO2温箱中培养。挑取培养48h后的菌落进行革兰氏染色、氧化酶试验、触酶试验、淀粉水解试验、棉子糖发酵试验及马尿酸水解试验。(2)GV药敏试验:通过K-B纸片法对GV进行青霉素G、四环素、环丙沙星、克林霉素、甲硝唑等药物的体外药敏试验。(3)GV与BV的相关性:用Amsel标准诊断BV(其中线索细胞的检查用吖啶橙染色法、革兰氏染色、生理盐水三种方法)分析GV与BV的相关性及用吖啶橙染色法检测线索细胞的可行性。 结果(1)GV分离培养:在BBC血培养皿上,37℃5%CO2条件下培养出灰白、半透明似露滴状菌落。革兰氏染色为阴性或染色不定的球样小杆菌,氧化酶试验阴性,触酶试验阴性,淀粉水解试验阳性,棉子糖水解试验阴性,马尿酸水解试验阳性。在临床采集的285份标本中,有66份阴道分泌物通过培养,鉴定出GV;(2)GV药敏试验:66株临床分离的GV对四环素、环丙沙星、克林霉素的敏感率分别为:81.81%,74.24%,86.36%。对青霉素G、甲硝唑的耐药率分别为16.67%和42.42%;(3)GV与BV相关性:在285名女性中共有58人患有细菌性阴道病,患病率为20.35%。其中就诊于性病科的48人,患病率为23.53%。健康女性中10人,患病率为12.34%(x2=4.47,P<0.05),两者差异有统计学意义;在BV组和非BV组,GV的检出例数分别为31例(53.45%),53例(15.41%),经统计学分析x2=37.55,P<0.01,两者差异有统计学意义;AO染色法与革兰氏染色法在检查线索细胞方面一致性尚可(Kappa=0.6944); 结论(1)在含兔血的BBC血培养皿上,5%CO2,37℃条件下48h后可以培养出阴道加德纳菌;(2)体外药物敏感性实验表明,GV对四环素、克林霉素、环丙沙星的敏感度较高,试验结果与国内文献报道相一致。某些GV菌株已经对青霉素G、甲硝唑两种药物产生了耐药;(3)性病组的BV患病率高于健康体检组;BV组的GV检出率高于健康体检组;性伴数≥2个者的BV患病率高于性伴数≤1个者;性伴个数≥2个的BV患者除患BV外,还伴随不同性传播感染(sexuallytransmittedinfections,STI)的情况出现;(4)吖啶橙染色法与革兰氏染色法在检测线索细胞方面没有差别。
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