绿色巴夫藻的培养及有关毒理学的初步研究

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微藻,是一类营养丰富、生长繁殖迅速、对环境的适应能力强、容易培养的生物。微藻及其代谢产物在生物制药、污水处理、天然食品的加工、生物饵料、生物肥料、可持续利用能源生产等方面,具有重要的经济价值和社会价值。本文主要就绿色巴夫藻的培养及与绿色巴夫藻及其代谢物EPA的毒理学相关的特性展开研究。 第一部分为绿色巴夫藻的培养条件探索及室外培养.EPA含量分析。可供参考的培养条件如下:光照强度4000~10000 lux左右,光照周期即为室外日照周期;初始pH值在8左右;接种浓度在0.05~0.1左右;维生素按单倍量添加,氮源的选择为硝酸盐,NaNO3、KNO3都可。在室外大规模培养中,随着天数的增加,绿色巴夫藻内的EPA及DHA含量占总脂肪酸的比例有逐渐上升的趋势,EPA占总脂肪酸的比例最高可达25.23%。说明绿色巴夫藻在生长后期能积累较多的EPA。 第二部分为重金属元素Cu和Zn引起绿色巴夫藻脂质过氧化水平和抗氧化酶活性的变化研究。过高浓度的Cu2+和Zn2+对绿色巴夫藻的影响与脂质过氧化有关,即MDA的生成量。与对照相比,当Cu2+浓度大于0.5mg/L、Zn2+浓度大于3.25mg/L时,MDA显著性升高。对绿色巴夫藻的抗氧化系统的研究表明,在金属胁迫下,抗氧化剂和抗氧化酶发生相应变化以对抗过氧化作用。在Cu2+胁迫下,GSH与SOD、CAT和GPX虽然在不同剂量表现并不完全一致,但都有着升高现象,且与脂质过氧化产物MDA有着相似的升高过程。在Zn2+胁迫下,抗氧化系统中各物质的表现却不尽相同,SOD活性在Zn2+胁迫下各组中差异不显著,CAT活性、GSH含量在Zn2+胁迫下各组较对照均有显著上升,而GPX活性与对照相比显著下降。总体而言,绿色巴夫藻对抗Cu2+和Zn2+胁迫的共同点是CAT和GSH的联合效应。 第三部分为绿色巴夫藻来源的EPA对环磷酰胺诱导的小鼠微核率及抗氧化物质的影响。加环磷酰胺能显著提高小鼠骨髓细胞的微核率,高剂量的EPA能显著降低由环磷酰胺诱导的微核率的上升,而在低、中剂量中没有显著降低。提示300mg/kg EPA对抗环磷酰胺的致微核率上升有效果。且摄取高剂量的EPA对动物的微核率无影响,是安全的。在脂质过氧化产物MDA方面,试验各组的血清中的MDA积累无显著差异。在肝匀浆中,结果显示加入环磷酰胺,相比于蒸馏水对照,引起了脂质过氧化水平的显著提高。而三个浓度的EPA均有显著降低脂质过氧化水平的作用。提示EPA有可能通过降低脂质过氧化水平与降低微核率相联系。综合三种抗氧化酶(SOD,CAT,GPX)的活性变化,在血清和肝匀浆的比较上显示,血清中酶的变化不显著,而肝匀浆中往往有显著差异。在三种酶的检测中,数据表明SOD与微核率的变化规律有一定的联系,可能是发挥主要作用的抗氧化酶。
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