一、本研究应用基因工程方法,构建了pPIC9k-β CG表达载体,经电转化毕氏酵母细胞,筛选出分泌性表达β hCG蛋白的阳性克隆株.此外,根据hCG的分子结构和理化特性,采用分子筛和离子交换层析等生化技术,获得较高纯度的hCG全分子蛋白.两种方法获得的hCG全分子及亚单位经鉴定证实其分子量和抗原性正确,为后续的噬菌体抗体文库的筛选提供了抗原保证.二、应用分子生物学方法,构建了一个库容为10<5>的免疫噬菌体抗体库.经过纯化的hCG抗原三轮淘筛后,不结合的噬菌体抗体库经单抗捕获的酵母表达βhCG再次筛选.在富集的文库中,随机挑选96个克隆制备噬菌体抗体,经双抗体夹心法进一步鉴定,得到18株与hCG和βhCG分子都结合的噬菌体抗体.对阳性克隆进行了可溶性表达,用双抗体夹心法鉴定可溶性单链抗体的结合活性.并对其中4株阳性克隆进行了测序分析.三、综合应用生物信息学方法,对获得的基因序列进行分析.结果表明确为抗体基因.同时确定了其框架区,互补决定区的序列.之后又通过同源建模,模建了所得抗体的三维结构.应用分子对接方法,模拟抗原抗体结合.结果显示单链抗体CDR区与hCGβ亚基上一段区域结合.根据文献中hCG表位数据,初步预测了了单链抗体表位.四、将高通量筛选平台分解为文库制备、自动化筛选、信号检测和虚拟筛选四个模块,结合本研究,以初级模型的方式积累试验经验,并分析可能引入的自动化元素.综合以上工作,提出了一个用于文库研究的试验筛选与虚拟筛选相结合的技术平台的构想.