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胃癌是一种发病率和死亡率都很高的恶性肿瘤。胃癌的发生发展受到遗传因素和环境因素的影响,其发病机制涉及多个异常的信号通路。CXCL8是一种多细胞来源的细胞因子,在多种恶性肿瘤细胞中高表达。CXCL8在肿瘤细胞中的过表达与肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成及EMT有密切联系。黏着斑激酶FAK在癌症中高表达,通过调节癌细胞迁移和上皮间质转化来促进癌症的发生发展。本研究利用实验室保存的MKN45和敲除FAK基因的胃癌细胞系MKN45(MKN45-FAK-/-)进行转录组测序,经差异表达基因分析,发现CXCL8在FAK基因敲除细胞中表达显著下调。基于CXCL8和FAK均在肿瘤发生发展的过程中发挥着关键作用,我们以人胃癌细胞MKN45为主要研究对象,人胃癌细胞NUGC3和NCIN87为辅,通过FAK功能缺失、抑制和过表达的方式来探究胃癌细胞中FAK对CXCL8表达的调控作用;通过细胞增殖,克隆形成,细胞迁移及EMT实验来检测CXCL8对胃癌细胞的促癌作用及FAK信号通路在CXCL8诱导的胃癌细胞促增殖、迁移及EMT过程中的调控作用。第一部分:转录组测序分析及验证,（1）对MKN45及MKN45-FAK-/-细胞系进行转录组测序分析,发现在FAK敲除细胞系中共筛选到277个基因发生差异表达变化,其中94个基因上调,183个基因下调;通过GO功能分析,KEGG分析以及差异表达基因pathway分析,选择DEG中的CXCL8（**p<0.01）作为后续研究对象;（2）qPCR和ELISA验证转录组差异表达基因分析结果,发现在MKN45-FAK-/-中,CXCL8表达显著下调（**p<0.01）;（3）qPCR和Western blot检测抑制FAK信号通路对胃癌细胞CXCL8的表达影响,TAE226抑制FAK导致CXCL8的表达下调（**p<0.01,*p<0.05）;（4）qPCR和ELISA检测过表达FAK对CXCL8表达的影响,发现过表达FAK导致CXCL8的表达显著增高（**p<0.01,*p<0.05）。第二部分,检测CXCL8对胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移及发生EMT的促进作用,（1）Western blot检测三种胃癌细胞中CXCL8的受体CXCR1/2,在三种胃癌细胞中,均检测到了CXCR1,几乎检测不到CXCR2;（2）细胞增殖实验,克隆形成实验和迁移实验检测CXCL8对胃癌细胞的促癌作用,发现CXCL8可以促进胃癌细胞的增殖、克隆形成和迁移（**p<0.01,*p<0.05）;（3）Western blot检测CXCL8诱导胃癌细胞发生EMT的情况,发现E-cadherin下调（**p<0.01,*p<0.05）,N-cadherin上调（*p<0.05）,证明CXCL8促进胃癌细胞发生EMT。第三部分,检测FAK信号通路在CXCL8诱导胃癌细胞促增殖、迁移及EMT过程中的调控作用,（1）Western blot检测CXCL8对FAK通路的激活情况,发现CXCL8可以激活FAK（*p<0.05）;（2）TAE226抑制FAK的条件下,细胞增殖实验和细胞迁移实验检测CXCL8对胃癌细胞的增殖和迁移的促进作用,发现在抑制FAK后,CXCL8对胃癌细胞促进增殖迁移的能力降低（**p<0.01）;（3）Western blot检测在MKN45及FAK敲除细胞系中CXCL8诱导细胞发生EMT的作用,发现CXCL8对MKN45-FAK-/-诱导的EMT的发生较MKN45相比有所抑制。综上所述,在胃癌细胞中,FAK的缺失、活性抑制或者过表达对CXCL8的表达分泌起着正相关的调控作用;三种胃癌细胞中表达CXCL8的受体CXCR1;CXCL8对胃癌细胞具有促进增殖、迁移、克隆形成以及上皮间质转化的作用;外源添加CXCL8激活MKN45中的FAK,表明CXCL8可以激活胃癌细胞中的FAK信号通路;在抑制FAK活性的条件下,CXCL8促进MKN45的增殖、迁移以及EMT都有一定程度的下调。由此证明,可能存在CXCL8/FAK信号通路调节胃癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和EMT。CXCL8/FAK信号通路在胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移及EMT中的作用研究将为阐明胃癌的发病机制及诊断和治疗方法提供理论基础和技术支持。