三种针术对大鼠便秘的缓解作用及机制

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针灸治疗消化系统疾病有明显优势,但不同针术的比较、针灸作用途径及作用机制的研究还处于初级阶段。本试验选用临床治疗便秘的常用穴位后海穴(GV-1),探讨白针水针与埋线对便秘大鼠的作用途径及作用机制。选用成年SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为对照组(A),模型组(B),西药组(C),白针组(D),水针组(E),埋线组(F)共6组,每组10只。对照组灌胃生理盐水,其余大鼠每天灌胃盐酸洛哌丁胺3 mg/kg/d,连续5天,便秘情况稳定后,第6天开始进行治疗,上午应用盐酸洛哌丁胺维持便秘,下午进行不同处理,连续7天。对照组和模型组在非穴位处进行白针刺激。西药组用莫沙必利1.3 mg/kg/d灌胃。白针组用一次性针灸针刺入GV-1,维持20 min。水针组GV-1注射0.1 mL VB12。埋线组将可吸收羊肠线埋入GV-1。除埋线组单次治疗外,其他各组每天1次。收集粪便,记录粪便粒数,观察粪便大小形状,计算粪便相关指标。HE染色法,观测各组试验大鼠肠道组织结构变化;ELISA法检测结肠组织中VIP、5-HT、SP的含量;IHC检测结肠组织中5-HT阳性表达,观察EC的形态及数目的变化;WB检测结肠组织中SERT、TPH蛋白表达水平;RT-qPCR法检测结肠组织5-HT3R、5-HT4R、SERT mRNA 的转录水平。结果表明,三种针术有效缓解临床症状,增加粪便粒数,加速小肠推进(p<0.05)。经过干预治疗,便秘大鼠结肠组织固有层肠腺结构不完整的情况有改善,杯状细胞排列整齐度有所恢复,分布均匀。三种针术均显著提高便秘大鼠肠道组织中SP水平(p<0.05),其中以水针与埋线作用最佳,同时显著降低便秘大鼠结肠组织VIP、5-HT含量(p<0.05),埋线组达到西药组效果。RT-qPCR结果表明,对GV-1进行三种针刺均显著提高便秘大鼠肠道组织的5-HT4R、5-HT3R和SERT的mRNA转录水平(p<0.05),埋线组达到或优于西药组。IHC结果显示模型组EC细胞数量偏多,经过西药治疗或三种不同针术治疗,有降低趋势;各治疗组EC细胞个体相对变小,分泌颗粒减少。白针、水针和埋线均可显著降低便秘大鼠结肠组织中的TPH蛋白水平(p<0.01),西药组下降19.11%,白针组下降49.61%,水针组下降51.74%,埋线组下降52.99%,以埋线组效果最优,三种针术之间无显著性差异(p>0.05),且优于西药组;三种针术均能提高便秘大鼠结肠组织中的SERT蛋白水平(p<0.01),白针与埋线效果最优。结论:白针、水针和埋线均有效缓解便秘症状,改善肠道组织结构,调节异常神经递质,抑制TPH的产生,有效提高结肠组织中的SERT蛋白水平,清除突触间隙过多5-HT;提高5-HT受体含量,5-HT与受体有效结合,使肠道蠕动与分泌功能得到改善;增加杯状细胞数量,使肠道粘液分泌情况有所改善。总体埋线效果最佳。
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