本实验室对红斑丹毒丝菌强毒株SE38和弱毒株G4T10的胞壁蛋白进行蛋白质组学研究,得到一批S/G差异倍数在1.5-2.0的蛋白质。其中的一些蛋白和红斑丹毒丝菌康复血清有较好免疫反应,选取这些蛋白进行研究,分析其能否作为亚单位疫苗。ERH₀412、PotA、UgpB、SpaA、ERH₁291、FusA、ERH₁090 和 CbpC 基因成功克隆到表达载体pET-28a上,ERH₀384、LemA和ERH₁227基因成功克隆到pET-32a表达载体上。目的蛋白SpaA和UgpB在上清中表达多一些,经镍柱纯化;其余的蛋白质主要表达于包涵体中,经尿素变性-复性纯化。BALB/c小鼠试验表明,各蛋白诱导小鼠产生抗体的能力不一,其中ERH₀412、PotA 和 SpaA 要强于 ERH₁291、ERH₀384、LemA、FusA、ERH₁090和CbpC。攻毒后抗原蛋白对小鼠的保护率SpaA（90%）PotA（60%）、ERH₀412（40%）高于 ERH₁291、ERH₀384、LemA、FusA、ERH₁090 和CbpC。选取对小鼠保护力较高的SpaA和PotA进行仔猪免疫试验,重组蛋白苗对仔猪均具有较高的安全性,试验显示:仔猪接种疫苗后,注射部位没有病变,疫苗吸收良好,没有肿块或化脓发生,采食正常,活泼好动,被毛光亮,接种第二天体温略有升高,迅速恢复正常。间接ELISA试验说明SpaA和PotA可以诱导仔猪在二免14天产生的抗体滴度达到1:20480以上,高水平的抗体可以持续三个月,直至第四个月抗体效价依然有效。仔猪组织脏器分菌试验表明,G4T10和SpaA仔猪不含红斑丹毒丝菌,在PotA仔猪的肝脏和脾脏分到少量细菌,而阴性对照组仔猪的五个脏器含大量的细菌。本课题首次在组织病理学角度分析红斑丹毒丝菌亚单位疫苗的保护效果。病理组织学分析发现,G4T10、SpaA和PotA免疫组仔猪在心脏、肝脏、肺脏和肾脏的病变较空白组仔猪要轻,主要表现为炎性细胞浸润,四组仔猪的脾脏病变较为严重,脾小结结构紊乱、红髓白髓分界不清、形成圆形空泡。蛋白SpaA是去掉信号肽和C端锚定序列后进行截短表达,抗原决定区域和已知序列有氨基酸差异,但其免疫效果没有降低,对仔猪有90%的保护力。该蛋白在多种血清型中分布广泛,较成分复杂的灭活苗和弱毒苗更具优势。PotA是本课题新发现的免疫效果较好的蛋白质,对仔猪有50%的保护力。此外,生物信息学分析、PCR和Western Blotting证实在红斑丹毒丝菌中分布广泛,保守性较高。