儿童特发性血小板减少性紫癜T细胞免疫功能的研究

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目的:建立一种准确的、客观的检测T淋巴细胞内细胞因子的方法,探讨T淋巴细胞亚群和Th1/Th2相关细胞因子在儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的变化及其意义。方法:使用流式细胞仪(FACS)双标记法对18例正常成人、10例正常儿童、19例ITP患儿全血中T淋巴细胞内细胞因子进行检测。用十四烷酰拂波醇乙酯(PMA)、依诺霉素(ionomycin)作刺激剂,刺激全血中T淋巴细胞表达细胞因子,以莫能霉素(Monencin)阻断细胞因子分泌至细胞外,应用抗CD4单抗和抗IFN-r或抗IL-4单抗同时标记淋巴细胞膜表面特异分子和表达被阻滞在细胞内的细胞因子,流式细胞仪进行检测分析。3组同时测T淋巴细胞亚群。结果:10例正常儿童的IFN-r、IL-4分泌水平以及T淋巴细胞亚群和成人基本一致;而19例特发性血小板减少性紫癜患儿的IFN-r分泌明显高于正常儿童、IL-4分泌显著低于正常儿童,Th1/Th2细胞的比值显著高于正常儿童;同时ITP患儿CD4+细胞减低,CD8+细胞升高,CD4+/CD8+细胞比值下降明显。结论:双抗体标记流式细胞检测法可以更客观、更准确地检测淋巴细胞分泌细胞因子的水平;儿童ITP存在T淋巴细胞表面标志表达异常,T淋巴细胞亚群比例失调,细胞因子分泌紊乱,是一种Th1优势的疾病,与ITP的发生发展密切有关,研究细胞因子分泌紊乱对指导ITP的治疗可能也具有一定的意义。
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