【摘 要】
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野生大豆（Glycine soja）具有极强的抗逆性和丰富的遗传多样性，为栽培大豆的亲缘较近的野生种，它是大豆育种极为重要的种质资源。野生大豆资源研究开发利用，对拓宽栽培大豆的遗传基础，提高大豆育种水平具有重要价值。通过RT-PCR方法从野生大豆中克隆到Ring-Finger12（GsRNF12）基因的cDNA全长。GsRNF12的开放阅读框为723bp，编码一个由240个氨基酸，包含一个C3HC
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野生大豆（Glycine soja）具有极强的抗逆性和丰富的遗传多样性，为栽培大豆的亲缘较近的野生种，它是大豆育种极为重要的种质资源。野生大豆资源研究开发利用，对拓宽栽培大豆的遗传基础，提高大豆育种水平具有重要价值。通过RT-PCR方法从野生大豆中克隆到Ring-Finger12（GsRNF12）基因的cDNA全长。GsRNF12的开放阅读框为723bp，编码一个由240个氨基酸，包含一个C3HC4功能域。氨基酸比对和进化分析结果表明GsRNF12蛋白与大豆GmRNF12亲缘关系最近，推测它们可能存在共同的起源。构建了原核表达载体pET-28a-GsRNF12，SDS-PAGE结果表明GsRNF12基因在工程菌BL21中获得表达。本研究采用Real-time PCR技术对GsRNF12基因的表达特性进行了分析。结果表明GsRNF12基因的表达受高盐、干旱、低温、ABA及SA的诱导。GsRNF12基因在野生大豆根、茎、叶中均有表达，表达的高低顺序为：根>叶>茎。构建了GsRNF12基因的植物表达载体，以农杆菌介导法转化拟南芥，除草剂Basta筛选得到T1代转基因拟南芥。对转GsRNF12基因T3代拟南芥进行低温、干旱、高盐胁迫处理。初步结果表明：与野生型拟南芥相比，转GsRNF12拟南芥抗低温、干旱、耐盐性明显提高。
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