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随着生物药研究快速发展,到目前为止有61个抗体药物上市,但抗体药物价格昂贵,各国医保负担重;第一代重磅抗体药物专利相继到期,高性价比的生物类似药被赋予期待;另外技术上新型抗体药物层出不穷,双特异性抗体、ADC药物、抗体片段、融合蛋白技术平台等,诸多新技术推动抗体药物的快速发展。在抗体药物研发及生产中需要连续监控保证药物的安全性,以更好地快速推动研发的进展,降低研发周期。然而,当前肽图谱分析平台,例如LC-MS-Tof,LC-TQ,存在价格昂贵,操作复杂,样品处理要求高等问题。QDa检测器作为操作方便、高性价比、稳定的单四级杆检测器,在生物药研究与生产过程中可作为一种常规分析方法。利用UPLC系统,TUV光学特性与QDa质谱特性,本研究发展并验证一种新的分析生物药的肽图谱方法。并探讨本方法在实验室交叉污染溯源上应用,作为常规实验室管理方法。首先,采用LC-Q-Tof方法确定源于阿达木单抗CDR区8个肽段作为特异性肽段代表整个抗体用于分析研究。针对QDa系统对8个肽段信息进行优化,得到在QDa系统中响应值最高的质核比数据;另外评估阿达木单抗最佳酶切条件,包括蛋白酶切比例与最佳酶切时间,最后得到最佳酶切条件为37℃,1:10,3h。10个其他抗体,包括曲妥珠单抗、西妥昔单抗、德尼单抗、奥法木单抗、戈利木单抗、Evolocumab、阿仑单抗、伊匹单抗、纳武单抗、Pembrolizumab用于评估方法特异性,结果均为发现非特异性。由于UV-MS的敏感性,LC-QDa系统具有高特异性;此系统的检测限为20μg/mL;样品残留为1.69%。此外,其它的确认参数,包括稳定性等也被评估。结果表明,新的LC-UV-QDa方法作为一种简单、高性价比、稳定的肽图谱方法适用于常规质量控制分析中。最后我们采用此方法检测模拟的阿达木单抗、西妥昔单抗和曲妥珠交叉污染样品,成功检测到目标蛋白阿达木单抗及溯源检测到西妥昔、曲妥珠单抗。