分子光谱研究生物大分子脱氧核糖核酸的分析应用

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本文以分子光谱—荧光光谱、紫外—可见吸收光谱及共振光散射光谱对脱氧核糖核酸进行了研究,全文主要内容如下: 第一章简述了DNA研究的重要意义,并概括了用于分析DNA的一些分析技术和测试手段,以及它们各自的特点。 第二章,用光谱探针溴化乙锭(EB)对劳氏青莲与脱氧核糖核酸的作用机制进行了研究。通过对体系的荧光光谱、紫外—可见吸收光谱及共振光散射光谱等方面的研究,结果表明:在pH为7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,劳氏青莲与脱氧核糖核酸之间存在着静电作用及嵌插作用,其结合常数为1.0×105Lmol-1。 第三章,在碱性条件下,脱氧核糖核酸(DNA)对孔雀石绿的共振光散射有增强作用,加入十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)进一步敏化该体系。共振光散射增强的程度与DNA浓度呈良好的线性关系,据此建立了测定DNA的共振光散射增强分析方法,已成功应用于样品中DNA含量的测定。 第四章报道了在碱性条件下,十六烷基溴化吡啶(CPB)与脱氧核糖核酸(DNA)体系产生较强的共振光散射,并且共振散射光的强度与DNA浓度呈线性关系,据此提出了基于阳离子表面活性剂的共振光散射法定量测定DNA。在实验条件下,最大散射波长363nm处,测定小牛胸腺DNA(ctDNA)和鱼精子DNA(fsDNA)的线性范围分别为0~2.0μgmL-1和0~1.25μgmL-1,检出限分别为0.07μgmL-1和0.05μgmL-1。 第五章,分别基于尿酸对Cu(Ⅱ)催化过氧化氢氧化吡咯红Y的活化作用、柠檬酸对Fe(Ⅲ)催化过氧化氢氧化吡咯红Y的抑制作用,提出了动力学荧光测定尿酸、柠檬酸的分析法,详细研究了介质、各试剂最佳用量及反应温度、反应时间对体系荧光强度的影响,方法成功地用于人体尿液中尿酸、汽水中柠檬酸含量的测定,结果满意。
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