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目的：利用L-精氨酸加入人离体肝细胞L02培养基中，使得L02中内源凝血因子Ⅷ(coagulation factorⅧ，FⅧ)重新表达，进而研究L-精氨酸激活L02中内源FⅧ重表达的调控机制和信号通路。 方法：将L02分为加药组，对照组，抑制剂组和空白抑制剂组，加药组加入L-精氨酸（终浓度为15mM），对照组用同体积的灭菌水取代L-精氨酸培养，抑制剂组在加入L-精氨酸前3小时加入L-NAME（终浓度为100mM），空白抑制剂组则只加入终浓度为100mM的L-NAME，分别培养12h、24h、36h、48h和60h。用RT-PCR方法检测L02中人FⅧ基因、iNOS基因、HNF1A基因、HNF4A基因、C/EBP alpha基因、NF-kappaB基因、I-kappaB alpha基因、CREB基因和sGC alpha3基因的转录水平，Western blot检测L02中人FⅧ、常规I-kappaB和磷酸化I-kappaB的表达情况，PKA磷酸化检测试剂盒检测实验体系中PKA磷酸化变化水平，双虫荧光素酶(dual luciferase)实验检测FⅧ启动子上游调控序列的转录活性，MSP(methylation special pcr)实验检测FⅧ启动子上游调控序列的甲基化水平。 结果：RT-PCR显示，加药组L02中人FⅧmRNA的转录，对照组、抑制剂组和空白抑制剂组均无人FⅧmRNA的转录，加药组iNOS、HNF4A、NF-kappaB、I-kappaB alpha和CREB的转录水平均有上升，HNF1A、sGC alpha3和C/EBP alpha转录水平均下降，对照组、抑制剂组和空白抑制剂组这些基因转录水平均无明显变化;Western blot显示加入L-精氨酸后，磷酸化I-kappaB表达量明显增加，其他组别则无此变化; PKA检测试剂盒显示加药组PKA磷酸化水平明显增加，其他组别无明显变化;双虫荧光素酶实验显示加药组人FⅧ启动子上游调控序列的转录活性明显增加;MSP实验显示FⅧ启动子上游调控序列的甲基化水平发生明显降低，去甲基化水平明显增加。 结论：L-精氨酸一方面通过NO-cGMP-PKG信号通路进而激活MAPK信号通路，导致人FⅧ基因启动子上游调控相关的转录因子表达发生变化从而激活人离体肝细胞中内源人FⅧ的表达，另一方面L-精氨酸通过NO胁迫诱导人FⅧ基因启动子上游调控序列的去甲基化从而激活下游人FⅧ的表达。