【摘 要】
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目的:使用重组质粒pcDNA3.1/TSHR268肌肉注射加电穿孔免疫BALB/c小鼠,构建Graves病(Graves disease, GD)小鼠模型。方法:①提取重组质粒pcDNA3.1/TSHR268,并进行酶切鉴定。②于
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目的:使用重组质粒pcDNA3.1/TSHR268肌肉注射加电穿孔免疫BALB/c小鼠,构建Graves病(Graves disease, GD)小鼠模型。方法:①提取重组质粒pcDNA3.1/TSHR268,并进行酶切鉴定。②于第1、4、7周对BALB/c小鼠腓肠肌注射重组质粒pcDNA3.1/TSHR268并在注射部位电穿孔进行免疫,并设立对照组。③于第0、2、5、8周进行小鼠内眦静脉取血,检测小鼠血甲状腺素(thyroxine, T4)、促甲状腺素受体氨基端蛋白抗体(thyroid stimulating hormone receptor N-terminal antibody, TRAb N)、促甲状腺素受体羧基端蛋白抗体(thyroid stimulating hormone receptor C-terminal antibody, TRAb C)水平。④第9周对模型小鼠进行99mTcO4-.显像及甲状腺病理学分析,构建GD小鼠模型。结果:(1)实验组小鼠血T4由免疫前的26.070±2.825ng/mL升高至免疫后的60.321±14.423ng/mL(P<0.05);其血TRAb N抗体水平由免疫前的0.287±0.0372mIU/ml升高至免疫后的0.538±0.154mIU/ml(P<0.05);其血TRAb C抗体水平由免疫前的12.277±2.952AU/mL升高至免疫后的28.601±4.523AU/mL(P<0.05)。生理盐水对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)经过3次免疫,实验组小鼠甲状腺对99mTcO4-的摄取能力较对照组明显增强。(3)实验组小鼠甲状腺病理结果显示甲状腺组织淋巴细胞浸润,甲状腺滤泡内胶质稀薄、颜色变淡,部分滤泡上皮细胞增生;生理盐水对照组甲状腺组织病理无异常变化。结论:重组质粒pcDNA3.1/TSHR268免疫加电穿孔,可以成功构建BALB/c小鼠GD模型。
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