【摘 要】
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研究内容:从现存的质粒中克隆出bFGF基因,同时,利用绿荧光蛋白基因作为报道基因,将两个基因分别插入载体质粒pssCMV并包装出相应的重组腺相关病毒rAAV/bFGF和rAAV/GFP,用rAAV
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研究内容:从现存的质粒中克隆出bFGF基因,同时,利用绿荧光蛋白基因作为报道基因,将两个基因分别插入载体质粒pssCMV并包装出相应的重组腺相关病毒rAAV/bFGF和rAAV/GFP,用rAAV/GFP转染体外培养的真核细胞NIH 3T3,证实重组腺相关病毒能够进入细胞并表达出绿荧光蛋白.用rAAV/GFP直接体内途径转染肌肉组织,重组腺相关病毒也能表达出绿荧光蛋白.证实载体质粒pssCMV的构建及重组腺相关病毒的包装是成功的.用rAAV/bFGF进行鸡胚尿囊膜实验,证实:重组腺相关病毒的表达产物能够促进鸡胚血管的形成.采用Shwartzman法制造兔股骨头缺血动物模型.分别于给药后3天、4周、6周、8周时处死1只兔,取双侧股骨上端进行组织病理学检查,证实股骨头缺血模型制造成功.经皮穿刺模型动物的一侧股骨上端,将重组腺相关病毒rAAV/bFGF注射入缺血的骨组织内,进行5周的短期干预治疗,另一侧作为自身对照.5周后进行组织病理学检查发现:重组腺相关病毒治疗侧股骨近端骨髓内血管密度增加,脂肪细胞数量少、细胞体积小.而自身对照侧血管密度低,脂肪细胞数量多、细胞体积大.干预治疗有效.
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