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目的通过建立幼鼠内毒素血症肝损伤的动物模型并予以胰岛素干预,研究胰岛素对LPS诱导的幼鼠肝细胞释放炎症因子TNF-α和IL-6的影响,以及TNF-α和IL-6与NF-κB活化水平的关系,了解胰岛素是否对内毒素血症所致的幼鼠肝损伤具有保护作用,并探讨其作用机制。方法18日龄wistar幼鼠72只随机分正常对照组(腹腔注射生理盐水,n=8)、内毒素血症组(LPS组,腹腔注射LPS,n=32)和胰岛素治疗组(腹腔注射LPS+皮内注射胰岛素,n=32)。LPS组和胰岛素治疗组LPS(5mg/kg)腹腔注射建立幼鼠内毒素血症模型,胰岛素组同时给予胰岛素(4IU/kg)皮内注射;正常对照组腹腔注射等容量生理盐水;LPS组和胰岛素治疗组根据建模后取标本时间的不同分2h、6h、12h、24h四个亚组,每个亚组8只,取肝脏制备石蜡切片和组织匀浆,普通光镜、电镜观察各组肝细胞的病理改变情况,ELISA法测定肝组织匀浆TNF-α和IL-6的含量,快速血糖仪检测幼鼠血糖浓度,赖氏法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的浓度,免疫组化法检测肝组织NF-κB的活化水平,并对结果进行统计学分析。结果:1、组织学改变:光镜下正常对照组肝细胞完整,结构清晰,未见变性和坏死;LPS组肝组织损伤较明显,肝细胞出现肿胀、空泡样变性、汇管区有炎症细胞浸润,点片状、大片状坏死等,以6h最明显,损伤等级评分与正常对照组比较差异有统计学意义(p＜0.05),胰岛素治疗组肝组织损伤均轻于LPS组,6h损伤等级评分与LPS组比较差异有统计学意义,p＜0.05;电镜下正常对照组内质网光滑,核膜完整,染色质均匀分布于核内;LPS组见胞浆疏松,线粒体肿胀,脊断裂或消失,内质网扩张,核膜出现切迹,染色质浓缩在核周边,核仁碎裂,损害以6h组最为明显;胰岛素治疗组各时点肝组织病理损害较LPS组轻。2、血糖水平:胰岛素治疗组在2h和6h比正常对照组、LPS组低(p＜0.05),12h、24h各组之间差异均无统计学意义(p＞0.05)。3、ALT水平:2h各组之间差异无统计学意义(p＞0.05),LPS组6h、12h及24h均较正常对照组高(p＜0.05),胰岛素治疗组在6h、12h、24h均较LPS组降低(p＜0.05),但仍高于正常对照组。4、肝细胞NF-κBp65蛋白的表达:LPS组核阳性细胞百分比较正常对照组高,差异有统计学意义(p＜0.05);胰岛素治疗组2h、6hNF-κBp65核阳性细胞百分比均明显低于LPS组(p＜0.05)。5、肝组织TNF-α、IL-6水平:在6h、12hLPS组高于正常对照组和胰岛素治疗组,差异有统计学意义(p＜0.05)。结论1.内毒素血症可引起肝损伤,导致肝细胞的破坏和肝功能的改变,说明肝脏是重症感染的受累器官之一;2.NF-κB的活化参与了内毒素血症肝损伤的发生,其机理可能是通过介导炎性介质TNF-α和IL-6的合成使肝细胞发生炎性损伤;3.胰岛素对内毒素血症肝损伤有保护作用,其机理可能是通过降低NF-κB的活化,减少TNF-α和IL-6的合成和释放,降低应激反应时期的血糖而起作用,但确切的机制有待进一步研究。