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嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌因其具有促进生长性能、改善氧化应激和调节免疫应答等功能而备受养殖业关注。然而不同益生菌菌株以及多种益生菌组合可能发挥出更好的功效。本研究旨在评价饲粮添加复合嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌制剂对产蛋后期蛋鸡生产性能和肠道健康的影响,为提高产蛋后期蛋鸡经济效益,推动微生态制剂在饲料添加剂领域中的应用提供参考和理论依据。首先,研究了饲粮添加嗜酸乳杆菌CGMCC1.18778和枯草芽孢杆菌ACCC11088组成的复合益生菌对产蛋后期蛋鸡生产性能和蛋品质的影响。2160只50周龄海兰褐蛋鸡随机分为3组,每组720只:NC组(提供基础饲粮)、LD组(基础日粮中添加250 mg/kg复合益生菌)、HD组(基础日粮中添加500 mg/kg复合益生菌)。预试期1周,正试期7周。结果表明,与NC组相比,饲粮添加复合益生菌后LD和HD组蛋鸡产蛋分别提高3.04%和2.55%(P>0.05);HD组蛋鸡每日饲粮摄入量降低7.47 g/d(P>0.05)。在鸡蛋品质方面,饲粮添加复合益生菌显著降低鸡蛋破损率,而各组蛋壳强度、蛋白高度、哈夫单位、蛋黄颜色、蛋形指数无显著变化。其次,探究了饲粮添加复合益生菌后对产蛋后期肠道健康的影响。每组随机挑选10只蛋鸡测定体内生化指标,结果显示,复合益生菌显著增强回肠和盲肠的总抗氧化能力,提高黏膜过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性,同时减少黏膜丙二醛的积累。与NC组相比,益生菌添加后回肠绒毛完整性得到改善、血浆脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)含量显著降低、回肠和盲肠紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin和Claudin-1)以及防御素(Av BD2和Av BD9)基因表达量显著上调、回肠杯状细胞数量和黏蛋白2分泌显著增加、回肠和盲肠中分泌型免疫球蛋白A含量显著增加。上述结果表明饲粮添加复合益生菌可以增强产蛋后期蛋鸡肠道屏障功能。此外,益生菌增加了回肠Ig G和盲肠Ig M的含量,下调肠道炎症进程相关基因(TLR4、My D88和NF-κB)的表达从而抑制肠道黏膜中促炎细胞因子(IL-6、IL-17、TNF-α和INF-γ)的分泌,并增加抗炎细胞因子IL-10在黏膜中的水平。接着,进一步探究了饲粮添加复合益生菌对盲肠菌群组成的影响。结果显示,饲粮添加复合益生菌显著提高了盲肠菌群α多样性和F/B值、显著降低了拟杆菌属、志贺氏菌属、罕见小球菌属相对丰度,增加了乳杆菌属、韦荣球菌属、气球菌属、巨球型菌属等微生物相对丰度,同时提高肠道菌群有益代谢产物短链脂肪酸的含量,减少有害菌群代谢产物氨氮含量。最后,利用广泛靶向代谢组探究饲粮添加复合益生菌对盲肠内容物中代谢物的影响。从盲肠内容物中筛选出56种代谢标志物,主要涉及到泛酸和辅酶A的生物合成、甘油磷脂代谢、氨酰-t RNA生物合成、嘌呤代谢、氨基酸代谢等多条代谢途径。相关性分析发提示拟杆菌属、乳杆菌属、气球菌属、韦荣球菌属、低嗜盐细菌属、unclassified_Bacteroidales和unclassified_Clostridiaceae等微生物与大多数差异代谢物显著相关。综上所述,饲粮添加嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌复合制剂可以提高肠道抗氧化能力、维持黏膜免疫和炎症稳态、调节肠道微生物组成和菌群代谢从而提高产蛋后期蛋鸡产蛋率,其中HD组的效果好于LD组。