【摘 要】
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本研究旨在合成可降解的聚乙烯亚胺(PEI)作为基因载体,从而实现高效低毒的非病毒基因转染。通过利用1,4-丁二醇二氯甲酸酯作为联接剂与小分子量PEI(<MW> = 800)缩合,我们获得
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本研究旨在合成可降解的聚乙烯亚胺(PEI)作为基因载体,从而实现高效低毒的非病毒基因转染。通过利用1,4-丁二醇二氯甲酸酯作为联接剂与小分子量PEI(<MW> = 800)缩合,我们获得了一种新的PEI衍生物(命名为PolyLinkB或简称为BLP)。在不同细胞系上将该聚合物载体用于两个常用的报告基因---绿色荧光蛋白基因及荧光素酶基因的转染时,我们获得了高于大分子PEI(<MW> = 25000)的基因转染活性及相当于小分子PEI (<MW> = 800)的低毒性。通过琼脂糖凝胶电泳分析发现,该连接产物在与DNA的比例为1:1(w/w)的条件下可以将DNA完全复合,并且形成平均粒径为65nm左右的复合物颗粒,载体与DNA比例(质量比)的进一步增大(5,7,10)对复合物粒径没有显著影响,同时复合物的Zeta电势也在载体材料与DNA的质量比超过1以后稳定在20mV左右。产物的红外光谱和核磁共振表征分别显示了氨酯结构的羰基伸缩振动(1698cm-1)及氨酯两侧α碳上的氢谱化学位移(δ=4,δ=2.5),确认了产物的结构。然而以已知分子量的PEI作为标准物进行GPC凝胶渗透色谱测试,显示合成产物的分子量仅为942.0924Da。这可能是由于交联产物的结构与PEI不同,导致分子量测试的误差。或者结构的改变使小分子产物具有了转染活性。总之,新的可降解PEI衍生物显示了理想的基因
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