外源性H2S单独或联合131I对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响

来源 :广州医学院 广州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:saarelff
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  观察新型气体信号分子硫化氢单独或联合131I照射对处于生长对数期或生长平台期的人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其在γ射线中增敏或拮抗的作用。  方法:  处于生长对数期细胞试验:  1.含10%FBS DEME培养液体外常规培养人乳腺癌MCF-7细胞;  2.采用终浓度1500umol/L的NaHS单独或联合不同作用时间、0.3mCi的131I作用于各分组细胞;  3.对照组、NaHS组、131I照射组及NaHS+131I照射组的结果:运用台盼蓝染色法计数检测细胞的死亡率,Hoechst33342/PI双染观察细胞形态改变,流式细胞术检测细胞周期分布的改变及细胞凋亡,LDH检测细胞的损伤程度,SDS-PAGE考马斯亮蓝染色,Western blot法检测BCL-2的表达。  处于生长平台期细胞实验:  1.含0.1%BSA DEME培养液体外常规培养人乳腺癌MCF-7细胞;  2.采用终浓度1500umol/L的NaHS单独或联合不同作用时间、0.3mCi的131I作用于各分组细胞;  3.对照组、NaHS组、131I照射组及NaHS+131I照射组的结果:运用台盼蓝染色法计数检测细胞的死亡率,Hoechst33342/PI双染观察细胞形态改变,流式细胞术检测细胞周期分布的改变及细胞凋亡,LDH检测细胞的损伤程度,SDS-PAGE考马斯亮蓝染色,Western blot法检测BCL-2的表达。  结果:  处于生长对数期细胞试验:  1.NaHS组:1500μmol/L NaHS单独作用于MCF-7细胞96h后,结果显示未能诱导细胞产生明显凋亡,BCL-2蛋白的表达也未见明显低于对照组(P≥0.05);NaHS可使细胞阻滞于G0/G1期,G2/M期百分率显著减少,与对照组比较有显著差异(P<0.05),细胞增殖受到明显抑制;LDH检测NaHS对处于生长对数期的MCF-7细胞有一定损伤作用。  2.131I照射组:照射时间≥2h的各分组,G2/M期百分率随照射时间的增加而增加,呈照射时间依赖性;其凋亡率也分别较对照组显著增加(P<0.5),然而照射时间为6、12h的分组之间的比较,凋亡率则未见显著差别(P≥0.05);照射时间为2、6h的分组,Bcl-2蛋白的表达水平随照射时间增加而降低,且与对照组比较均明显降低(P<0.05),照射时间为12h的分组中Bcl-2蛋白的表达并未随照射时间的增加而降低,且较照射时间为6h的分组显著增加(P<0.5)。  3.NaHS+131I照射组:各分组细胞的G2/M期百分率随照射时间的增加而增加,与对应同等照射时间的131I照射组相比较,G2/M期百分率仍显著减少(P<0.05);其凋亡率随照射时间的增加而增加,并且照射时间为2、6、12h分组的凋亡率分别较对应同等照射时间131I照射组显著增加(P<0.05);各分组细胞的Bcl-2蛋白的表达水平随照射时间的增加而降低,呈时间依赖性;且与对照组比较均有显著差异;LDH漏出活性随照射时间的增加而增加,呈时间依赖性,其中照射时间为6、12h的两分组的LDH活性均较对应同等照射时间的131I照射组显著增加(P<0.05),但两组之间未见显著差异。  处于生长平台期细胞实验:  1.NaHS组:1500μmol/L NaHS单独作用于MCF-7细胞96h后,结果显示未能诱导细胞产生明显凋亡,BCL-2蛋白的表达也可见明显低于对照组(P<0.05);NaHS可使细胞阻滞于G0/G1期,G2/M期百分率显著减少,与对照组比较有显著差异(P<0.05),细胞增殖受到明显抑制;LDH检测NaHS对处于生长对数期的MCF-7细胞有一定损伤作用。  2.131I照射组:各分组的G2/M期百分率与对照组比较均显著增加(P<0.05),并随照射时间的增加而增加;其中照射时间为2h与6h的两分组(E与G)之间比较,G2/M期百分率未见显著差异(P≥0.05);照射时间≥2h的各分组的凋亡率也分别较对照组显著增加(P<0.5),其中照射时间为2h与6h、6h与12h的分组之间的比较,凋亡率则未见显著差别(P≥0.05);照射时间为6、12h的分组,Bcl-2蛋白的表达水平随照射时间增加而降低,与对照组比较均明显降低(P<0.05),且两组之间比较有显著差异。  3.各分组细胞的G2/M期百分率随照射时间的增加而增加,与对应同等照射时间的131I照射组相比较,G2/M期百分率仍显著减少(P<0.05);其凋亡率随照射时间的增加而增加,并且照射时间为2、6、12h分组的凋亡率分别较对应同等照射时间131I照射组显著增加(P<0.05);细胞培养液中 LDH活性也随照射时间的增加而增加,呈时间依赖性,其中照射时间为6、12h两组之间比较未见显著差异,照射时间≥2h的两分组的LDH活性均较对应同等照射时间的131I照射组显著增加(P<0.05);各分组Bcl-2蛋白的表达水平与对照组比较均有显著差异(P<0.05),其中照射时间≥2h的各组随照射时间的增加,Bcl-2蛋白的表达水平随之增加。  结论:  1.无论MCF-7细胞处于生长对数期或生长平台期,外源性H2S均未能诱导细胞凋亡;但能明显抑制细胞增殖;  2.处于生长平台期的MCF-7细胞较处于生长对数期,对γ射线不敏感。  3.处于生长对数期的细胞,外源性H2S增加其在对γ射线辐射敏感性,与细胞G2/M期比例显著减少相关,其中的分子机制可能与抑制Bcl-2蛋白的表达相关。  4.处于生长平台期的细胞,外源性H2S增加其在对γ射线辐射敏感性,并较处于生长对数期的作用更强,这也与细胞G2/M期比例显著减少相关,其中的分子机制不仅与抑制Bcl-2蛋白的表达相关。
其他文献
杂交水稻旱地栽培技术鉴定会议于9月18日至21日在温州举行。由我所作栽研究室和文成县农科所主持承担的杂交水稻旱地栽培技术的研究课题,在协作组成员的共同努力下,对杂交水
近两年来,我们进行了棉花营养钵苗床抽行留苗试验。实践证明,这是一项促进棉花平衡增产的有效措施。其特点是: (一)争得季节,花工少,有利于降低成本。抽行留苗只要在苗床内
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
护好秧苗,迎接早插,是当前抓好早稻丰产的一项重要措施。今年各地早稻播种,一般提早了一个季节以上,这对延长早稻生长期,保证早稻丰产,打下丁一个极其良好的基础。但早播要
为了更有效地组织稿件,减少译稿同志不必要的精力消耗,去年我们曾先后征求了一些科研、教学和生产单位的意见,查阅了近几年我国主产麦区科研、生产方面的资料,结合我国目前麦
马铃薯品种底西芮,以其抗病烂、抗退化、产量高等优点,在四子王旗马铃薯生产中初露锋芒。1982年种植70亩,在对15个农户的32亩示范田测产,滩梁地平均亩产 At the end of the
在农业学大寨大好形势的推动下,我们学习北京市大兴县芦城公社芦城大队水稻深层追肥的经验,1975年在县示范场、陆家、渤海公社三个单位进行了小面积试验。一年的实践证明,水
目的研究高糖在体外对大鼠骨髓来源内皮祖细胞的功能的影响及其分子机制,为糖尿病外周血管病变提供新的治疗靶点。方法密度梯度离心法获取大鼠骨髓单个核细胞,EGM-2培养,荧光
短波广播台站节目传输技术的应用直接影响着信号发射质量,为了提高短波广播台站节目发射连续性和节目质量,既要应用好短波广播台站节目传输技术,又要做好设备的维护和保养。
2003年中国债券市场发行总量为7975亿元,比2002年增加1437.14亿元,发行总量再创新高。债券市场作为资本市场的重要组成部分,为金融体系提供巨大的流动性,为投资者开辟低风险