Numb是一种内吞调节蛋白,定位于网格蛋白clathrin包被的囊泡,能够参与跨膜受体的转运。Numb和Numblike是同源基因,两者在功能上具有重叠性,Numb和Numblike在各组织器官中广泛表达。有研究证明在小脑浦肯野细胞中,Numb蛋白能够通过调节mGlu1受体的转运影响小脑共济协调能力。然而在其他脑区,尤其是在与情绪、认知功能相关的海马区域Numb和Numblike的功能尚未有相关的研究。mGlu5作为I型代谢型谷氨酸受体中的重要成员和mGlul受体均位于兴奋性神经元的突触后膜,对于突触的形成以及突触可塑性的调节都起着至关重要的作用。mGlu1的变化与神经退行性疾病、精神障碍等疾病相关,而mGlu5的相关研究尚不清楚。本实验研究发现Numb能够与mGlu5结合,并通过抑制其内化和回收利用来促进mGlu5的膜表达。更有意思的是,我们通过三箱行为学实验发现Numb/Numblike的敲除导致了小鼠出现自闭症样的表型。目的:探究Numb是否影响神经元中代谢型谷氨酸受体mGlu5跨膜的转运以及其中的机制,通过行为学实验观察Numb/Numblike在海马中特异性敲除是否影响脑区相关的行为学表型,对将来进一步研究认知、精神、情感障碍等相关疾病提供实验依据。方法:免疫荧光染色和Co-IP实验观察在体内和体外Numb与mGlu5的相互作用,Numb是否影响mGlu5的膜表达。通过Western Blot技术检测Numb对mGlu5的膜表达是如何影响的。构建海马区特异性敲除小鼠,利用旷场实验和三箱行为学实验观察与对照组相比Numb的缺失是否会造成小鼠情绪、认知等方面的障碍结果:1、通过免疫荧光染色观察发现在海马组织中Numb与mGlu5存在共定位的现象,细胞荧光染色结果发现两者分布具有部分重叠性。Co-IP结果也显示Numb能将mGlu5沉淀下来。2、Western Blot结果显示在海马组织突触后组分中,cKO小鼠与对照鼠相比mGlu5表达减少。Triton X-100不可溶组份结果显示Numb的缺失影响了细胞膜上mGlu5的内吞过程和再循环。3、行为学实验结果显示,在旷场实验中,Numb/Numblike条件性敲除小鼠(cKO)与对照鼠相比表现无异,并未表现出焦虑样的行为。但是在三箱社交实验中,cKO小鼠表现出明显的社交恐惧。结论:1、Numb与mGlu5相互作用,Numb不影响mGlu5的总表达,但是可以影响mGlu5在细胞膜上的表达。2、Numb影响mGlu5在细胞膜上的内吞和再循环过程。3、Numb/Numblike的缺失不会导致小鼠焦虑样行为,但是会造成自闭症样的行为。