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为研究中药复方的组方原理和配伍规律,以葛根芩连汤为代表方,用药物代谢动力学方法,研究各个配伍组对该方中每味药的主要活性成分体内过程的影响,以此来阐明中药配伍规律,以及组方如何通过配伍来达到增效减毒的作用。 目的:建立血清中葛根素(Pu)、黄芩苷(Bai)、小檗碱(Ber)的含量测定方法;考察不同配伍对葛根素、黄芩苷、小檗碱药代动力学参数的影响规律。通过对葛根素、黄芩苷、小檗碱药动学的考察,研究中药配伍对药物体内过程的影响。 方法:采用L8(27)正交表对葛根芩连汤进行组方分解组合,分别以葛根、黄芩、黄连作为主要因素并固定不变,以方中另外三味药为三因素,“有”和“无”为两水平,得出分别含葛根、黄芩、黄连的8个组合。每个配伍组取处方量4倍的药材,分别加水1600ml浸泡15min,先煎葛根20min,余药共煎30min,煎二次,趁热粗过滤,合并滤液,90℃定容1000ml。取900ml,浓缩到50ml,备用。将24只比格犬,随机分为8组,每组灌服一组配伍汤药,给药后分别在规定的时间取血2ml,置肝素钠抗凝剂的离心管中备用。将采集的血样离心(2000r/min)20min,取上清液,按照(1:8)加入乙腈,在旋涡混合器上震荡5min,离心(2000r/min)20min,取上清液,N2气吹干,再加甲醇1ml于旋涡混合器上溶解,0.22μm滤膜过滤,即得样品溶液。样品溶液用高效液相色谱(HPLC)法按照以下条件进行测定:(1)葛根素色谱条件:色谱柱:Zorbax SB-C18柱(250×4.6mm,5μm);流动相:甲醇—乙腈—水(12:8:80:);流速:1.0ml/min;柱温:室温;检测波长:250nm。(2)黄芩苷色谱条件:色谱柱:Zorbax SB-C18柱(250×4.6mm,5μm);流动相:甲醇:0.2%磷酸(48:52);流速:1.0mL/min;柱温:室