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[目的]FZD8在胃癌中的表达、作用及其机制尚不清楚。通过探讨FZD8在胃癌中的表达情况和生物学功能,以及FZD8影响胃癌生物学功能的分子生物学机制。最终探讨FZD8对胃癌细胞生物学行为的影响及机制。[方法]一、RNA-seq等检测FZD8mRNA和蛋白在胃癌组织中的表达水平;通过生物信息学分析FZD8及相关信号通路对胃癌侵袭和转移能力的影响。收集整理60例胃癌病人临床病理特征,通过单因素和多因素回归分析来分析患者FZD8表达和患者临床病理特征直接的关系;通过生存分析来分析FZD8相对高表达和相对低表达患者的总生存率;二、通过qRT-PCR和Western blot检测不同胃癌细胞系中过表达的FZD8,明确胃癌细胞中FZD8的异常表达。通过过表达或者干扰胃癌细胞中FZD8的表达,细胞功能实验分析检测细胞侵袭和转移能力的变化;进一步通过动物实验构建胃癌原位肝转移模型,对比胃癌肝转移情况,同时检测侵袭和转移相关的分子标记物的变化;三、为了进一步探讨FZD8调控胃癌细胞侵袭和转移能力的分子生物学机制,Western blot检测胃癌细胞中β-catenin信号通路及其下游蛋白表达的变化。[结果]一、RNA-seq等结果表明:FZD8mRNA和蛋白在胃癌组织中显著高表达;进一步分析FZD8表达与临床患者病理特征之间的关系的结果表明:高FZD8表达与肿瘤淋巴结转移、远处转移和临床分期有显著相关性;Kaplan-Meier分析显示相比低FZD8表达的患者,高FZD8表达的患者表现为更短的总生存率;回归分析表明,FZD8是胃癌患者预后不良的独立预测因子,总之,这些数据提示FZD8异常高表达与胃癌预后不良密切相关;二、qRT-PCR和Western blot结果表明FZD8mRNA和蛋白在胃癌细胞中的表达明显高于正常胃组织腺体细胞;细胞功能实验结果显示:在胃癌细胞中干扰FZD8的表达会降低胃癌细胞的细胞侵袭和转移能力;反之,在胃癌细胞中过表达FZD8会促进胃癌细胞的侵袭和转移能力。进一步通过裸鼠胃癌原位肝转移模型实验显示,与干扰对照组相比,干扰FZD8表达组,胃癌肝转移显著受到抑制。瘤体免疫组化证实MMP2和MMP9的表达明显减少;因此,体内和体外的研究表明,干扰FZD8表达可以抑制胃癌细胞侵袭和转移能力;三、Western blot结果显示:我们通过在胃癌细胞系中改变FZD8的表达,检测β-catenin信号通路及其下游靶基因的表达变化进而明确FZD8调控β-catenin信号通路。在胃癌细胞SGC-7901和MKN-45中干扰FZD8的表达,β-catenin蛋白表达显著下降,其下游靶蛋白WISP1、HoxB9、Survivin蛋白表达水平亦下调。同时,与侵袭转移相关的蛋白标记物MMP2、MMP9和N-cadherin亦下调,E-cadherin蛋白表达上调。反之,在FZD8相对低表达的胃癌细胞系SGC-7901和MKN-45中过表达FZD8蛋白。β-catenin蛋白表达显著上调,其下游靶蛋白WISP1、HoxB9、Survivin蛋白表达水平亦上调。同时,与侵袭转移相关的蛋白标记物MMP2、MMP9和N-cadherin亦上调,E-cadherin蛋白表达下调。[结论](1)FZD8蛋白在胃癌组织高表达,胃癌组织中FZD8高表达提示更低的生存率;(2)FZD8是胃癌细胞侵袭和转移的独立危险因素;(3)FZD8促进胃癌细胞的侵袭和转移能力;(4)FZD8通过激活β-catenin信号通路促进胃癌细胞侵袭和转移。