肿瘤已经成为造成人类死亡的主要病因之一，研究发现，肿瘤细胞之所以能够在机体内存活，是因为它能够利用多种机制来逃逸机体的免疫监视。因此，如果能够通过一定的方式激活机体的抗肿瘤免疫反应，将达到治疗肿瘤的目的，这就是目前广泛研究的肿瘤免疫治疗。肝癌是一种死亡率很高的癌症，它在我国的发病率很高，研究肝癌的免疫治疗策略具有重要的理论价值和实际意义。一种有效的肿瘤疫苗需要包括：a.特异的肿瘤抗原；b.能够有效呈递肿瘤抗原的载体。树突状细胞是最有效的专职抗原呈递细胞，可以作为呈递肿瘤抗原的理想载体；热休克蛋白不仅是重要的分子伴侣，能够结合多种多肽，而且是天然的佐剂，能够协助其所结合的抗原多肽的加工、呈递，因此来源于肿瘤细胞的热休克蛋白制备物可作为较理想的肿瘤抗原。本研究结合了树突状细胞和热休克蛋白在引发抗肿瘤免疫应答方面的特性，研究了一种新的肝癌免疫治疗策略。 本研究主要包括以下几方面的内容：a.利用柱层析的方式从肝癌细胞中分离纯化热休克蛋白gp96和hsp70；b.从人的外周血中分离、培养树突状细胞及T细胞；c.分别利用所分离纯化的热休克蛋白gp96和hsp70来荷载树突状细胞，研究热休克蛋白gp96和hsp70对树突状细胞的作用，及这种荷载了热休克蛋白的树突状细胞是否能够激活T细胞，从而产生特异性的抗肿瘤免疫应答，其中在特异性抗肿瘤免疫应答方面，主要测定了T细胞增殖、细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)及IFNγ分泌水平。实验结果表明，从肝癌细胞中分离纯化的热休克蛋白gp96和hsp70都能够诱导树突状细胞的成熟，如使得树突状细胞表面的HLAⅡ、共刺激分子CD80和CD86、成熟标志分子CD40和CD83表达增加等；而且这些成熟的树突状细胞能够刺激自身T细胞高水平的增殖及释放类型Ⅰ细胞因子IFNγ，并能够激活特异于肝癌细胞的细胞毒性T淋巴细胞。这些实验结果表明荷载了肝癌细胞来源的热休克蛋白的树突状细胞能够有效的引发特异性的抗肿瘤免疫应答，这种肝癌疫苗具有以下优点：a.利用热休克蛋白作为肝癌抗原不需要事先鉴定肿瘤抗原；b.热休克蛋白中含有多种肝癌抗原；c.利用热休克蛋白作为肝癌抗原不受HLA单元型的限制；d.利用热休克蛋白作为肝癌抗原能够引发靶向于多种肝癌抗原的多克隆的特异性CTLs;e.树突状细胞表面具有热休克蛋白的特异受体，能够通过受体介导的内吞作用而有效的捕捉热休克蛋白/多肽复合体，从而克服了因单独的抗原多肽在树突状细胞表面停留时间不够长所产生的抗原捕捉效率低的限制。本研究在体外研究了一种新的肝癌疫苗的抗肿瘤效应，这为以后的临床研究奠定了基础。