玉屏风提取液对环磷酰胺致大鼠骨质疏松的防治作用观察及其质量控制研究

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目的 1.研究用环磷酰胺建立大鼠骨质疏松的动物模型,并观察该类型骨质疏松的骨形态计量学、骨代谢和骨生物力学的改变情况。2.探讨玉屏风提取液对此类型的骨质疏松的骨形态计量学、骨代谢和骨生物力学的影响。3.建立起玉屏风提取液的指纹图谱,从而为其质量标准的建立及日后有效成分的寻找打下基础。 方法 1.药理学部分40只大鼠随机分为4组,正常对照组(control组):灌胃给予5ml/Kg.d生理盐水。环磷酰胺组(CP组):灌胃给予环磷酰胺4.5mg/Kg.d。玉屏风提取液组:灌胃给予环磷酰胺4.5mg/Kg.d及玉屏风提取液(YPF组)5ml/Kg.d,碳酸钙+VD组:灌胃给予环磷酰胺4.5mg/Kg.d及0.4mg/kg.d。于实验第15d处死动物,取左侧胫骨进行骨组织形态计量动静态学参数骨小梁面积百分数(%Tb.At),骨小梁厚度(Tb.Th),骨小梁数量(Tb.N),骨小粱分离度(Tb.SP),动态参数包括荧光标志周长百分数(%L.Pm),矿化沉积率(MAR),骨小粱周长形成率(BFR/BS),骨小粱面积形成率(BFR/BV),骨小粱体积形成率(BFR/TV)测量;取右侧股骨,进行骨生物力学参数弹性载荷,弹性桡度,最大载荷,最大桡度,刚度,骨钙,骨磷,骨镁及骨羟脯氨酸含量测定。 2.质量控制部分重复提取玉屏风提取液10份,通过HPLC建立起合适的分析方法对其中成分进行分析,找出其中稳定存在的共有峰,建立玉屏风提取液指纹图谱。 结果 1.环磷酰胺及玉屏风提取液对大鼠骨形态计量学参数的影响与对照组比较,环磷酰胺模型组大鼠胫骨松质骨组织形态计量学静念参数4个指标差异有统计学意义,其中骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)降低了48.5%(P<0.05)、骨小梁厚度(Tb.Th)降低了17.9%(P<0.05)、骨小梁分离度(Tb.Sp)(P<0.01)增加了67.9%(P<0.05);骨小梁数量(Tb.N)降低了37.8%(P<0.01)。动态参数方面,荧光周长百分数%L.Pm减少了54.5%,骨矿化沉积率MAR,骨形成率BFR/BS、BFR/BV、BFR/TV分另U降低了21.6%、61.0%、50.0%、72.2%(P<0.05)。骨吸收参数方面,与对照组比较,环磷酰胺组单位骨小梁面积破骨细胞数(Oc.N)、破骨细胞周长百分数(%Oc.Pm)。与环磷酰胺模型组相比,玉屏风提取液组使%Tb.Ar增加了127.7%(P<0.01),Tb.Th增加了27.3%(P<0.01),Tb.N增加了75.6%(P<0.01),Tb.SP减少了43.1%(P<0.05),动态学参数方面,%LPm增加了114.0%,MAR增加了61.5%(P<0.01),BFR/BS增加了278.6%(P<0.05),BFR/BV增加了191.5%(P<0.05),BFR/TV增加了410.0%(P<0.05),骨吸收参数方面,Oc.N、%Oc.Pm差异无统计学意义。 2.环磷酰胺及玉屏风提取液对大鼠骨生物力学的影响与对照组相比,环磷酰胺模型组骨生物力学的两个指标最大载荷(降低了16.2%)及刚度(降低了27.7%)差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,玉屏风提取液组的两个指标最大载荷(增加了25.7%)及刚度(增加了67.9%)差异有统计学意义(P<0.01)。 3.环磷酰胺及玉屏风提取液对大鼠骨钙及骨羟脯氨酸含量的影响与对照组比较:环磷酰胺模型组大鼠胫骨骨代谢5个指标骨羟脯氨酸/骨干重(降低了26.1%)、骨有机质/骨干重(降低了26.1%)、骨钙总量/骨干重(降低了17.6%)、骨磷总量/骨干重(降低了12.4%)及骨镁总量/骨干重(降低了24.7%)差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较:玉屏风提取液组大鼠胫骨骨代谢5个指标差异均有统计学意义,其中骨钙总量/骨干重(增加了22.0%)(P<0.01);骨镁总量/骨干重(增加了38.4%)、骨磷总量/骨干重(增加了23.4%)、骨羟脯氨酸/骨干重(增加了42.9%)及骨有机质/骨干重(增加了42.9%)(P
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