【摘 要】
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瘦素(leptin)是一种由脂肪组织分泌的蛋白,其主要功能是调控体重和能量的平衡,还通过内分泌、自分泌或旁分泌方式对机体外周组织或器官的功能发挥广泛的生物调节作用。已发现
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瘦素(leptin)是一种由脂肪组织分泌的蛋白,其主要功能是调控体重和能量的平衡,还通过内分泌、自分泌或旁分泌方式对机体外周组织或器官的功能发挥广泛的生物调节作用。已发现瘦素可以通过细胞周期和MyoD来调控细胞增殖,还可通过降低CK的活性和减少肌细胞生成蛋白的量而抑制细胞分化。另外,在猪成肌细胞的研究中瘦素可以通过PI3K/Akt/mTOR、AMPK、JAK/STAT和MEK信号通路调控细胞发育。但是,瘦素对鸭成肌细胞的作用一直缺乏研究。本实验以鸭骨骼肌成肌细胞为研究对象,采用离体培养成肌细胞和荧光定量PCR等技术与方法,研究外源性瘦素对鸭成肌细胞增殖与分化关键基因的表达影响,并探究其可能的调控通路。结果表明:1、低浓度瘦素(1ng/mL)对鸭成肌细胞具有促进增殖的作用,并且促进作用不会随着时间的增加而保持,长时间的处理会抑制增殖。高浓度瘦素(10ng/mL. 100ng/mL)对鸭成肌细胞增殖没有促进作用。2、不同浓度瘦素均抑制鸭成肌细胞关键基因的表达,并且随着处理时间的增加抑制效果逐渐加强。3、抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路后,瘦素对鸭成肌细胞增殖关键基因的促进作用发生改变,表明瘦素对成肌细胞的增殖调控与PI3K/Akt/mTOR信号通路相关联。当抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路后,瘦素对成肌细胞分化的抑制作用降低,但是抑制作用没有消失,说明瘦素通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控鸭成肌细胞的分化关键基因,但PI3K/Akt/mTOR信号通路并不是瘦素抑制成肌细胞分化的唯一途径。4、抑制AMPK后,瘦素促进成肌细胞增殖及抑制成肌细胞分化的效果均发生了显著变化,这表明瘦素的作用可能主要是通过AMPK实现的。
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