FK866在卵巢癌裸鼠移植瘤中的作用及机制的研究

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目的:建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型,研究烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)在卵巢癌裸鼠移植瘤中的表达情况,并通过Nampt特异性抑制剂FK866处理裸鼠,探讨Nampt参与卵巢癌的作用机制。研究FK866抗卵巢癌的作用及机制。  方法:采用人卵巢腺癌SKOV3细胞株,种植于24只雌性Balb/c-nu裸鼠颈背部皮下,随机平均分成4组:联合用药组、FK866组、顺铂(DDP)组及对照(Control)组。实验自SKOV3卵巢癌细胞接种第21天肿瘤大小约100mm3开始,FK866,按20 mg/kg剂量,每天腹腔内注射给药两次,连续给药4天,后停药3天,再次连续给药4天后停药3天;DDP,每周两次,每次5mg/kg,腹腔内注射,连续两周;对照组用生理盐水。给药2周后,采用颈椎脱臼处死裸鼠,完整取出瘤块,研究实验组对裸鼠卵巢癌移植瘤成瘤及生长的影响,采用生化检测、实时定量PCR检测、蛋白质印迹检测及免疫组织化学法检测联合用药组、FK866组、DDP组及对照组中NAD、Nampt、p53、和Sirt1的表达情况。  结果:  (1)FK866与顺铂均能使裸鼠皮下移植瘤的体积减小,但FK866较明显,在联合用药组移植瘤体积显著减小;  (2)采用生化检测发现,FK866能显著减少NAD的含量,而DDP不能,联合用药组NAD减少更显著;  (3)通过实时定量PCR检测、蛋白质印迹检测及免疫组织化学法检测发现,在联合用药组中的Nampt蛋白表达减少,p53表达增加,Sirt1表达减少。  结论:  (1)Nampt蛋白特异性抑制剂FK866能显著抑制荷瘤鼠肿瘤的增长;  (2)Nampt蛋白特异性抑制剂FK866与常用化疗药物顺铂联合应用时能更显著抑制荷瘤鼠肿瘤的增长;  (3)Nampt蛋白特异性抑制剂FK866抗卵巢癌的作用机制可能与抑制Nampt的活性,减少NAD的合成,进而下调Sirt1的表达,上调p53基因的表达有关;  (4)本研究结果为临床上治疗卵巢癌提供了新的思路,即Nampt蛋白特异性抑制剂FK866联合顺铂在抗卵巢癌中具有潜在的应用价值。
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