猪解耦联蛋白基因(UCP2和UCP3)的克隆及其原核表达的研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bingjilin1986
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解耦联蛋白是一类对机体能量平衡涉及的增重、静止代谢率和能量转化效率等性状起显著影响的基因家族。本研究通过对长白猪、梅山猪的肌肉、脂肪组织RNA的提取和反转录扩增,得到了UCP2和UCP3基因编码框的全序列及部分5’、3’调控区域。其中UCP2基因编码序列为930bp;UCP3为927bp。总共发现长白猪与梅山猪的11处多态位点:其中UCP2同义突变4处;UCP3同义突变5处,错义突变2处。UCP3的碱基A-448-G造成氨基酸Arg-150-Gly的改变,另外在碱基T-776-C造成氨基酸Met-259-Thr的改变。将这两种型的编码序列,分别加入pET30a(+)原核表达载体中予以表达。同时,通过对UCP2和UCP3编码区的比较,我们发现一个高度保守的区域,显示解耦联基因家族的第二跨膜结构域可能是其核心结构域。总之,UCP2和UCP3基因存在的某些氨基酸错义突变可能与猪的能量代谢性状相关。本实验为进一步研究UCP基因转录、调控以及对猪能量代谢的影响提供一定的理论依据与实验基础。
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