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目的:1.在培养基中加入氯化钴(CoC12)模拟化学缺氧培养细胞,以观察低氧条件下缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-lα,HIF-1α)在人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达。2.利用CoC12建立的低氧模型,观察钙信号对乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7 HIF-1α表达及其侵袭转移能力的影响。方法:1.在培养基中加入CoC12模拟化学缺氧,用MTT法检测CoC12对乳腺癌细胞的抑制情况;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CoC12与HIF-1α的mRNA转录的量-效和时-效关系,从而为肿瘤细胞的缺氧模型选择一个最佳的作用浓度和最佳的作用时间。2.将实验分成对照组、加CoC12组、加CoC12和钙通道阻滞剂维拉帕米(verapamil,VPL)组,用RT-PCR方法检测各组中HIF-1α的mRNA水平;蛋白印迹实验(Western blotting)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry)检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中HIF-1α蛋白的表达;Millicell小室人工重组基底膜侵袭迁移实验检测各实验组中细胞侵袭迁移能力的改变。结果:1. 150μmol/L CoC12作用24h可作为最佳的乳腺癌细胞缺氧模型。2.两株细胞各实验组都存在HIF-1α的mRNA转录和蛋白的表达,加CoC12组HIF-1αmRNA水平和蛋白水平较对照组显著增高(P<0.01);加VPL干预后,HIF-1αmRNA水平和蛋白水平都大大降低(P<0.01),MCF-7和MDA-MB-231间有显著差异(P<0.01);两株细胞的侵袭迁移能力VPL+ CoC12组较CoC12组明显降低(P<0.05),MDA-MB-231更明显(P<0.01)。结论:1. CoC12可诱导乳腺癌细胞缺氧而使HIF-1α高表达。2.阻断钙信号转导途径可以使HIF-1α的表达下调,进而抑制乳腺癌细胞的侵袭转移能力。