【摘 要】
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该论文以醛基化玻片为芯片基片,抗体或抗体片断作为捕获探针,应用自动点样仪制作了含有多种捕获探针的微点阵免疫芯片.每组微点阵所占面积为0.4cm×1.4cm~0.75cm×1.4cm;每个
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该论文以醛基化玻片为芯片基片,抗体或抗体片断作为捕获探针,应用自动点样仪制作了含有多种捕获探针的微点阵免疫芯片.每组微点阵所占面积为0.4cm×1.4cm~0.75cm×1.4cm;每个微点的直径约为150μm;并确定了捕获探针与基片上活化基团之间实现连接的各项反应条件.应用高特异检测探针对芯片上捕获探针的生物活性进行检测,得到了均一、稳定的成像结果,表明该免疫芯片具有良好的捕获性能.以此免疫芯片为捕获系统,选用荧光标记物为检测系统,并以夹心免疫分析为反应构型,建立了同时检测多种靶蛋白的微型化同步多元分析方法;该论文在具体实验中采用了多种肿瘤标志蛋白的单克隆抗体或抗体片断作为捕获探针,以FITC荧光素标记的亲和素为检测探针,可以实现最多六种已知肿瘤标志蛋白的同步分析.该论文选用了单克隆抗体片断F(ab)2作为捕获探针,使芯片的多项性能指标得以进一步提高:(1)增加了单个微点面积内探针的数量;(2)因为探针分子的稳定区(Fc区)已被切除,从而减少了后续分析中的非特异性反应;(3)有利于引入第二识别系统以提高分析特异性和实现检测探针的统一性.从该论文实验内的数据比较和与文献报道结果比较,以F(ab)2为捕获探针的免疫芯片在同步多元分析的灵敏度和特异性方面均有较为明显的提高.
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