汞灯作为活化光源的三维超高分辩随机光学重建荧光显微镜研究

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随机光学重建荧光显微镜是一种新型的能打破光学衍射极限的超高分辨显微镜,在细胞生物学、祌经生物学以及材料化学等多领域有巨大的应用潜力,但它较为复杂的搭建光路、昂贵的价格成为普及使用的阻力。本文描述了一种用汞灯作为活化光源的三维超高分辨荧光显微镜的新型实现方法。该方法是基于一台常规倒置荧光显微镜的改造,我们保留了其汞灯作为超分辨系统的活化光源代替一般使用的激光光源,因为活化光源的功率密度要求不高(1-100 W/cm2),汞灯不仅可以胜任并且具有光谱宽、价格便宜、通用等优势。同时加入不昂贵的半导体激光器作为激发光源,用高功率密度实现亮暗状态的快速转换,减少成像所需时间。最终实现了一个价格便宜、光路简单、并且达到了40 nm的横向分辨率和100 nm的轴向分辨率的超高分辨荧光显微镜,并验证了其在细胞成像上的可行性。同时实现方法对于常规显微镜的改造较小,并且文章详细的叙述了完整的硬件搭建、软件使用、细胞成像的流程,可以作为生物实验室甚至学生实验自己搭建超分辨显微镜的参考教程。
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