扶肺固肾饮对COPD大鼠肺泡灌洗液黏蛋白5AC影响的研究

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目的观察扶肺固肾饮方对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)模型大鼠支气管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)黏蛋白5AC(Mucin5AC,MUC5AC)含量、血白细胞计数及分类计数、肺组织病理形态学和大鼠一般情况的影响,探究扶肺固肾饮方对COPD大鼠治疗的作用及对气道黏液高分泌的影响,给扶肺固肾饮方的临床开展应用提供实验依据,为开发治疗COPD的方案和中药提供新思路。方法将50只雄性Wistar大鼠适应性饲养1周后随机抽取10只作为正常组,余下40只均制成COPD大鼠模型。采用烟熏加脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)气道灌注方法诱导COPD大鼠模型,造模后随机处死2只造模大鼠和2只正常组大鼠取全肺组织做病理切片确认造模成功,将余下大鼠随机分为模型组、扶肺固肾饮高、中、低剂量组。然后开始灌胃给药,正常组和模型组灌胃蒸馏水,扶肺固肾饮高、中、低剂量组分别灌胃相应浓度的扶肺固肾饮中药,期间观察并记录大鼠一般情况。灌胃结束后采集标本和检测相关指标,用酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测大鼠支气管肺泡灌洗液中MUC5AC的含量,显微镜下观察大鼠肺组织病理形态学改变,用传统人工计数法计数白细胞总量及分类计数。有关实验数据采用SPSS23.0统计软件进行统计处理。结果1.大鼠的一般情况:造模前大鼠均健康,进食、饮水、二便、体重均正常,反应灵敏,毛色有光泽,无咳嗽、喷嚏、气喘等呼吸道症状;造模后大鼠前期逐渐出现呼吸道症状,纳差、便秘,毛色发黄,活动量减少;中期大鼠稍适应,进食饮水增加,出现烦躁易激惹打群架现象,后期大鼠呼吸道症状加重,明显消瘦,精神萎靡,毛色枯槁;经扶肺固肾饮中药干预后的大鼠一般情况均有不同程度的改善,以扶肺固肾饮中剂量组大鼠的改善最好,扶肺固肾饮高剂量组和扶肺固肾饮低剂量组大鼠无明显差别。2.大鼠的肺组织病理形态学:正常组大鼠肺组织外观大小正常,病理切片镜下观察肺组织纤毛、管壁、肺泡等结构正常完整,粘膜各层未见明显炎症细胞浸润。与正常组比较,模型组大鼠肺组织外观体积增大、膨胀,呈灰白色,弹性较差,支气管管腔内渗出物增多,病理切片镜下观察肺组织出现纤毛脱落、管壁增厚、毛细血管充血、肺大泡、大量炎症细胞浸润等结构异常改变。经扶肺固肾饮中药干预后的大鼠肺组织外观和病理切片镜下观察较模型组大鼠均有不同程度改善,以扶肺固肾饮中剂量组大鼠改善最明显,扶肺固肾饮高剂量组和扶肺固肾饮低剂量组大鼠无明显差别。3.血白细胞计数和分类计数:与正常组比较,模型组大鼠血白细胞计数显著高于正常组(P<0.01),且以中性粒细胞升高为主;与模型组比较,扶肺固肾饮高、中、低剂量组大鼠血白细胞计数明显低于模型组(P<0.01),且以中性粒细胞下降为主,以扶肺固肾饮中剂量组下降最明显(P<0.01);扶肺固肾饮高剂量组和扶肺固肾饮低剂量组大鼠血白细胞计数和分类计数均无明显差别(P>0.05)。4.BALF中MUC5AC的含量:与正常组比较,模型组大鼠BALF中MUC5AC的含量显著高于正常组(P<0.01),与模型组比较,扶肺固肾饮高、中、低剂量组大鼠BALF中MUC5AC的含量均明显低于模型组(P<0.01),且以扶肺固肾饮中剂量组最明显(P<0.01),扶肺固肾饮高剂量组和扶肺固肾饮低剂量组大鼠无明显差别(P>0.05)。结论1、扶肺固肾饮方能抗气道黏液高分泌,其机制可能是通过减少气道黏液黏蛋白5AC的含量,从而改善气道黏液高分泌状态。2、扶肺固肾饮方能明显减轻COPD大鼠炎症反应,修复肺组织损伤。3、扶肺固肾饮方能明显改善COPD大鼠咳嗽、咳痰、气喘等呼吸道症状,具有化痰、祛痰、止咳的功效。其机制可能跟该方抗气道炎症和抗气道黏液高分泌有关。
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