目的：　　研究外阴病变组织及外阴鳞癌细胞系A-431中EEN-B1基因表达情况及其甲基化水平，探讨该蛋白表达与该基因甲基化的关系及两者在外阴鳞癌发生发展中的作用。　　方法：　　运用免疫组化方法和Westernblot法检测外阴病变组织标本中EEN-B1蛋白表达情况，采用重亚硫酸盐测序PCR联合TA克隆测序法检测外阴鳞癌组织中EEN-B1启动子甲基化情况。将甲基转移酶抑制剂5-Aza-dc作用于A-431细胞系，运用Westernblot及BSP法检测处理前后EEN-B1蛋白表达及基因甲基化水平的变化，采用MTT法及流式细胞术检测处理前后A-431细胞增殖及凋亡情况。　　结果：　　EEN-B1蛋白在外阴鳞状细胞癌组织中表达阳性率为48.08％，在外阴上皮内瘤变组织中的阳性率为68.08％，在正常外阴组织中表达阳性率为100％。外阴鳞癌、外阴上皮内瘤变与正常外阴组织分别比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。Westernblot检测得到同样的结果，在外阴鳞癌、外阴上皮内瘤变及正常外阴组织中该蛋白表达阳性率分别为6.67％(1/15)、26.67％(4/15)、100％(15/15)，差异具有显著性;BSP联合TA克隆测序法检测发现外阴鳞癌组织中EEN-B1启动子的甲基化率为54.66％，与正常外阴组织的12.16％相比，差异具有统计学意义(P＜0.05);经10-7mol/L5-Aza-dc处理A-431细胞系72小时后，EEN-B1启动子的甲基化率由67.05％下降至26.82％(P＜0.05)，而该蛋白表达明显上调。MTT法检测5-Aza-dc可抑制A-431细胞的增殖，随浓度增大、作用时间的延长抑制作用更明显。流式细胞术检测显示5-Aza-dc的浓度为10-6mol/L时，细胞凋亡率最高。　　结论：　　1、EEN-B1蛋白表达下降在外阴鳞状细胞癌的发生、发展中起一定作用。　　2、EEN-B1表达下降的原因之一可能为其启动子的甲基化。　　3、5-Aza-dc可使A-431细胞的增殖能力下降，凋亡水平上调，呈浓度和时间依赖性。