层层组装与纳米材料结合制备新型DNA电化学生物传感器的研究

来源 :青岛科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhouchaowenit
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文的研究目的是希望通过纳米材料、层层组装技术构建聚合物/DNA,纳米材料/DNA,聚合物/纳米材料等多层膜,然后在多层膜的基础上制备新型的DNA电化学生物传感器,以实现对DNA的高灵敏高选择性的检测,为DNA检测提供了新的手段与方法。主要包括以下内容:1.利用正电性的纳米ZnO和负电性的dsDNA之间的静电吸附作用,把它们层层组装构成(ZnO/dsDNA)n多层膜,并运用循环伏安和交流阻抗的方法对多层膜的构建进行了监测。通过检测负载在多层膜上的电活性探针MB的微分脉冲伏安(DPV)响应信号研究了镍的化合物对DNA的损伤,MB在多层膜上“负载/释放/重复负载”的过程能够有效地区别出完好的DNA膜和损伤后的DNA膜。2.把正电性的阳离子聚合物聚赖氨酸(pLys)和负电性的DNA层层组装在碳纳米管修饰的碳糊电极表面,然后利用电活性探针亚甲基紫(MV)与dsDNA的相互作用,制备了(pLys/dsDNA)n-MV,微分脉冲伏安响应信号表明,(pLys/dsDNA)n上的MV经过空白溶液的洗脱之后,能够获得释放,同时(pLys/dsDNA)n还具备再次吸附MV的能力,具有很好的可逆性;我们将制备的(pLys/dsDNA)n-MV用于致癌金属镉的化合物对DNA氧化性损伤的检测及锌对DNA的保护作用,研究结果表明,这种DNA电化学传感器能够有效的检测镉对DNA的损伤,在锌离子存在的情况下对DNA能够起到一定的保护作用。3.在带负电的巯基丙酸修饰的金电极表面吸附上带正电的阳离子聚合物聚赖氨酸,然后利用纳米金-碳纳米管杂合体(Au-CNT)表面带负电的纳米金和带正电的聚赖氨酸之间的吸附作用,用层层组装的方法构建了(Au-CNT/pLys)n多层膜,并运用电化学的方法对多层膜的性质和制备的最优化条件进行了研究,最后在多层膜的基础上,利用多层膜最外层带正电的聚赖氨酸和DNA上带负电的磷酸骨架之间的吸附作用,成功地实现了探针DNA的固定和目标DNA的杂交,制得DNA电化学生物传感器,并对传感器的制备条件进行了优化。实验表明,该DNA电化学生物传感器对转基因玉米PAT基因片段有较好的选择性,能有效地区分不同的碱基序列,对互补序列检测的线性范围为1.0×10-10mol/L~1.0×10-6mol/L,检测限达到2.45×10-11mol/L。4.利用共价键合的方法在带负电的巯基丙酸修饰的金电极表面吸附上包裹着氨基(-NH2)的金纳米粒子(AuNP),依靠金纳米粒子表面带正电的-NH2与聚氨基苯磺酸(PABSA)带负电的磺酸根(-SO3)之间的静电吸附吸附作用,用层层组装的方法构建了(AuNP/PABSA)n多层膜,多层膜表现出良好的转移电子能力以及在中性媒介中的氧化还原活性;然后在多层膜上固定DNA探针并使用了计时电位法研究了DNA的固定和杂交,同时对传感器的制备条件进行了优化;最后应用此DNA电化学传感器对经HindⅢ限制性内切酶酶切后的转基因大豆样品进行了测定,并用传感器检测含量不同的转基因大豆DNA和非转基因大豆DNA的混合溶液,杂交前后的电流差与转基因DNA的含量呈良好线性关系,可以直接用于转基因大豆DNA中转基因成分的定量检测。
其他文献
  分析了锅炉过热汽温加减负荷过程中调节、变工况汽温调节的危险点、再热汽温的调节特点等常见的的原因,并针对原因提出了解决方法。
  支吊装置是管道系统的重要组成部分,起着承受管道重量、限制管道位移和控制管道振动的重要作用,其性能的好坏、承载是否合理都直接影响管道的寿命及安全运行。本文结合某厂
  本文简述了国电浙江北仑发电厂机组及一、二期五台600MW亚临界锅炉、三期两台1000MW超超临界锅炉设备概况,讲解、分析、提出了刚投产不久的1000MW超超临界锅炉总体质量、
  本文阐述了DG1089/17.4-Ⅱ锅炉在投产及168试运过程中性能及运行中表现出的问题,希望为为大型CFB锅炉运行调整提供思路和参考.
本研究为利用恶臭假单孢杆菌Pseudomonas putida KT2442以发酵法合成功能型生物高分子材料聚羟基苯烷酸酯(polyhydroxyphenylalkanoates,简称PHPhAs)。首先在摇瓶中探讨了培养基组成及发酵条件对菌体生长及PHPhAs积累结果的影响,确定了聚合物PHPhAs中单体的组成及比例,并在5L发酵罐内采取不同的发酵策略,得到了高效合成PHPhAs的优化发酵控制策
  汽包水位是汽包炉运行的重点调整和监视参数,汽包水位的调节至关重要,直接影响到机组的运行安全,本文结合岱海电厂四台亚临界汽包锅炉的实际运行经验,总结了汽包水位调节的一
  本文根据理论知识结合现场实践经验,详细的介绍了"四管"泄漏的原因分析和"四管"泄漏的预防措施,最后从技术管理方面介绍了预防"四管"泄漏的管理经验。
西藏当代小说已走过了近半个世纪的发展历程。从宏观的角度看,这个过程无疑是一个不可分割的整体。但如果我们作一些微观、细致的考察、辨析,却也不难发现,这个作为整体的过程,其
纳米金催化剂由于其特殊的催化性能而受到关注。目前针对于纳米金催化剂的研究多集中于气相催化氧化方面,对于其液相氧化的活性及制备条件对活性的影响研究相对较少。本文以液
  广东河源电厂2×600MW超超机组已经投入商业运行,两台机组在基建调试、168期间及以后的试运行阶段,均没有发生炉管泄漏,创造出国内超超临界机组"零泄漏"记录,这是国内超超临