不可分型流感嗜血杆菌(Nontypeable Haemophilus influenzae, NTHi)可以与宿主层粘连蛋白、纤连蛋白和多种胶原蛋白等多种细胞膜基质成分结合。同时,NTHi可以通过其表面的纤溶酶原受体,与宿主体内的纤溶酶原(Plasminogen, Pig)结合。吸附在NTHi细胞表面的Pig,在宿主组织型纤溶酶原激活剂的作用下,将Pig激活为有蛋白水解活性的纤溶酶(Plasmin, Pm),降解宿主组织屏障结构,达到扩散和深层入侵的目的。脂蛋白(a) [Lipoprotein(a), Lp(a)由载脂蛋白(a)[Apolipoprotein(a), Apo(a)和低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein, LDL)组成,其中的Apo(a)分子与Pig在结构上有高度同源性,都含有赖氨酸结合位点(Lysine-binding sites, LBS)。因此,Lp(a)很可能与NTHi表面的Pig受体天冬氨酸酶(Aspartase,ASP)结合,从而竞争性的抑制NTHi细胞表面ASP与Pig的结合。本文对人血浆脂蛋白(a)与NTHi (ATCC49247)细胞表面ASP的相互作用进行研究。首先在大肠杆菌BL21 (DE3)中克隆表达了NTHi的纤溶酶原受体蛋白-天冬氨酸酶(rASP),以及敲除该蛋白C末端K的突变蛋白(rASP△K)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)、ELISA结合抑制试验(Binding-inhibition ELISA)、亲和层析实验结合Western blot分析的方法,检测ASP与人血浆Lp(a)的相互作用。结果显示,人血浆Lp(a)可以与rASP特异性结合,而与rASPAK不结合,说明rASP碳末端的K是两者结合所需的关键氨基酸基团；同时,rASP不能与LDL结合,且EACA对rASP与Lp(a)的结合的抑制作用具有浓度依赖性,并且1 mM的EACA可以完全抑制两者的结合,说明rASP与Lp(a)的结合作用与rASP中的K和Lp(a)中的LBS有关。此外,Lp(a)对rASP与Pig结合的抑制作用具有浓度依赖性,Lp(a)的使用量在50 ng、100 ng时,rASP与Pig的结合值分别降低了14.7%、30%。因此,本研究证实了人血浆Lp(a)通过其LBS能够与rASP碳末端的K发生特异性结合,以及Lp(a)对rASP与Pig的结合具有一定的抑制作用。