【摘 要】
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本论文系从海南省霸王岭土壤放线菌的分离、抗MRSA活性菌株的筛选、菌株的鉴定及发酵优化等几个方面进行了较为系统的研究。采用高氏一号培养基作为放线菌分离培养基,从霸王
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本论文系从海南省霸王岭土壤放线菌的分离、抗MRSA活性菌株的筛选、菌株的鉴定及发酵优化等几个方面进行了较为系统的研究。采用高氏一号培养基作为放线菌分离培养基,从霸王岭的土样中,共分离到287株放线菌,以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA为模式菌进行活性菌株的筛选,初筛得到抗MRSA活性放线菌35株,经过复筛得到2株活性较强且遗传稳定的活性菌株----Gda0301和Gda0305。以这两株活性菌为目标菌,进行了更深入的研究。结合菌株Gda0301和Gda0305各自的形态特征、培养特征、生理生化特征、16S rDNA及其系统发育分析,将Gda0301鉴定为灰变异链霉菌霸王岭亚种Streptomyces griseovariabilis subsp. bawangling;菌株Gda0305与秘鲁链霉菌S.peruviensis同源性最高,仅为97.7%,且在形态与培养特征、生理生化特征方面存在较大差异,可能是链霉菌属的一个新种,有待于DNA-DNA杂交进一步鉴定。同时,对Gda0301和Gda0305进行了发酵优化。确定菌株Gda0301最佳培养基组成及发酵条件为:蔗糖1.0%,可溶性淀粉1.5%,大豆粉0.5%,酵母膏1.0%,K2HPO4 0.05%,初始pH值7.0~7.2,种龄48h,接种量12%,200r/min,培养6d,培养温度28℃,250mL三角瓶装液量75mL。确定菌株Gda0305的最佳培养基组成及发酵条件为:蔗糖1.5%,可溶性淀粉1.5%,大豆粉0.5%,酵母膏0.5%,K2HPO4 0.075%,初始pH值7.0~7.2,种龄60h,接种量10%,200r/min,发酵时间144h,培养温度28℃,250mL三角瓶装液量75mL。
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