D-核糖高产菌株的选育及其发酵调控的研究

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以枯草芽孢杆菌D-202为出发菌株,经紫外诱变,筛选到一株可以耐高核糖的莽草酸缺陷型突变株D-756.经摇瓶发酵,D-核糖产量可达到59.1g/l.该株菌株的遗传稳定性良好.通过摇瓶研究,发现添加适量的柠檬酸和EDTA以及在发酵过程中补加玉米浆能提高D-核糖的产量.通过研究5L自控发酵罐发酵条件,在枯草芽孢杆菌突变株发酵生产D-核糖过程中,采用葡萄糖和葡萄糖酸钙混合发酵,葡萄糖酸作为pH调节剂,能提高D-核糖的产量.经酶活测定,发现流加葡萄糖酸能提高单位发酵液中葡萄糖酸激酶的酶活.通过葡萄糖酸或其内酯维持发酵pH在7.2,培养72h后可产核糖76.8g/l.而柠檬酸的添加可以提高葡萄糖脱氢酶和葡萄糖酸激酶的比活,减缓葡萄糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶的比活的下降趋势.基于以上研究,我们在5L发酵罐中,利用葡萄糖酸或其内酯维持发酵pH值在7.0,同时添加适量的柠檬酸,培养76h后D-核糖的产量达90.2g/l,比对照提高了32.3%.
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