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目的:纳米刀(不可逆电穿孔)是一种新的肿瘤消融技术,利用电脉冲引起胞膜发生纳米级穿孔,导致细胞死亡。为了了解纳米刀消融胰腺组织的有效性及安全性,本文对猪正常胰腺组织进行了实验研究。 方法:本研究在对3头实验用巴马猪进行气管插管全麻,并对其正常胰腺组织行开腹纳米刀消融手术,并于消融术前、术后1小时、3小时、1小时、5天及处死前穿刺腔静脉,留取血液,行白细胞及淀粉酶检测,分别于5天、10天、15天三个时间点各处死1头实验用巴马猪,取大体标本,对消融区域的胰腺组织行H-E染色、TUNEL染色、电镜超薄切片,通过光学显微镜观察消融区域胰腺组织和细胞结构的变化,并透射电子显微镜观察消融区细胞超微结构的改变。 结果:纳米刀消融时胰腺组织轻度水肿,无明显出血及胰液渗出。3头实验用巴马猪术后恢复良好,未出现异常表现,取标本时发现胰腺周围组织未见明显粘连、消融区胰腺组织质地略硬。所有猪白细胞及淀粉酶在术后即有升高,随后缓慢下降,术后3天便降至术前水平。光镜下显示三个时间段消融区猪胰腺组织与正常区域对比均有明显的区别,随时间推移,消融区域与正常胰腺组织分界逐渐清晰,消融区可见大量细胞死亡,胰腺小叶结构破坏,纤维组织填充。经TUNEL染色可见消融区域大量凋亡细胞,正常胰腺组织几无凋亡细胞表达。透射电镜下可见消融区胰腺腺泡细胞超微结构改变,细胞体积变小,细胞质浓缩,核仁破碎消失,染色质高度凝聚、边缘化,粗面内质网消失,符合细胞凋亡特征。通过各种方式观察,消融区主胰管及其较大属支胰管、动静脉结构均未见明显变化。 结论:1、纳米刀消融可对胰腺组织产生不可逆性损伤;2、经纳米刀消融胡,在消融区域,较大的胰管及血管结构得以保存;3、纳米刀导致细胞死亡的方式很可能是诱导细胞发生凋亡;4、在合理的电场参数设置下,纳米刀在消融时对实验动物是安全的。