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目的应用多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing, MLST)对临床分离白念珠菌进行分型研究,同时与ABC (ATP-binding cassette)分型、随机扩增多态DNA技术(randomLy amplified polymorphic DNA, RAPD)结果比较,研究菌株分型与标本来源、药物敏感性等之间的关系,建立国内白念珠菌MLST数据库。方法1.收集临床分离白念珠菌,进行体外药物敏感性测定,选取10株氟康唑耐药株,23株氟康唑敏感株,提取菌株DNA。2.建立MLST分型方法,选择7对管家基因进行PCR扩增,并将目的基因产物测序,然后将测序结果与标准序列比对后上传至MLST网站数据库,获得相应的由7对管家基因组成的等位基因谱,最后将等位基因谱再次提交网站确认序列型(Sequence types, STs).3.选取ABC分型和RAPD特定引物进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳后确定分型。4.将MLST结果经MEGA4.O生物信息学分析软件分析后,采用非加权分组算术均方根法(UPGMA)制作最小生成树,进一步分析ST与菌株信息、其他分型方法的关系。结果1.33株临床白念珠菌通过MLST产生了33个STs,采用ABC方法分类为3型,采用RAPD方法引物RSD-12产生13型,引物OPE-18产生11型。2.最小生成树选取区分值0.0025作为分界线划定组,产生8个组,显示白念珠菌的MLST型别呈现多样性,广泛分布在各个进化支上。结论1. MLST具有较高的分辨力,是一种方便、快速的分子生物学方法,可用于流行病学和菌群多态性的研究。2.聚类分析表明MLST分型结果与ABC分型有关系,但与菌株的标本采集来源、医院来源、RAPD分型结果或抗真菌药耐药性无明显相关。3.初步建立了MLST分型方法和国内白念珠菌MLST数据库。