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干扰性小RNA是一类非常短的仅有二十几个核苷酸大小的RNA分子,可以作为转录后抑制子通过与靶基因的3-UTR区结合而执行对其靶信使RNA的切割和翻译抑制。目前,科学家们已在动植物中发现了大量具干扰性的SmallRNA,它们不仅参与病毒的复制、干细胞的分裂、心脏的形成,还与艾滋病、白血病、糖尿病及畸形病变有关。真菌中,已发现许多有关RNAi的小RNA如siRNA、disiRNA、piRNA,对其机制中各种组分的研究也很全面,但是有关新型隐球酵母中干扰性Small RNA的报道几乎没有。
本文主要针对本实验室前期在新型隐球酵母中获得的干扰性小RNA文库,选取了具有代表性的10个Small RNA进行干扰功能验证。本文通过设计巧妙的Small RNA报告基因系统,对体内的Small RNA的功能进行了分子水平的功能论证。同时,又对干扰功能的可遗传性进行了分析;结合已有的实验成果初步证实新型隐球酵母体内的Small RNA通过经典的RNAi的途径发挥干扰作用,为其后续沉默机制的进一步研究提供了理论依据;并进一步证明在担子菌新型隐球酵母中存在具有干扰性功能的microRNA。