混合溶剂连续梯度分离儿茶素单体效应模型构建及分离设备设计

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儿茶素是茶叶中主要成分茶多酚的主要部分,为茶多酚总量的70-80%。其具有抗肿瘤、清除自由基、抗心脑血管疾病,降脂降糖、消炎防龋齿等重要的生物活性,日益受到人们的关注。天然存在的儿茶素单体主要有8种:儿茶素(eatechin,简称C)、表儿茶素(epicatechin,简称EC)、没食子儿茶素(gallocatechin,简称GC)、表没食子儿茶素(epigallocatechin,简称EGC)、儿茶素没食子酸酯(catechin-3-gallate,简称CG)、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin-3-gallate,简称ECG)、没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechin-3-gallate,简称GCG)、表没食子儿茶素没食子酸酯(epi-gallocatechin-3-gallate,简称EGCG)及咖啡碱(caffeine,简称CAF)。   本文以儿茶素总量为90%的粗品为原料,采用两种互溶、极性相反的混合溶剂体系进行儿茶素单体的分离,在单因素的基础上,采用正交设计实验,优化混合溶剂体系分离儿茶素单体的条件为:乙醇-石油醚体系中乙醇与石油醚体积比为4:6,溶剂温度力-5℃、pH为4.0-5.0,儿茶素单体EGCG在溶液中析出,沉淀中EGCG含量为68%,CAF仅为18%,方差分析表明混合溶剂比例与溶剂温度对儿茶素单体分离至关重要。   采用传统的柱层析法与混合溶剂体系进行比较。柱层析选用硅胶、大孔树脂DIOI为填料,进行静态吸附和动态洗脱,其结果表明:硅胶对EGCG、ECG的吸附性强于大孔树脂D101,而大孔树脂D101对CAF的吸附性强于硅胶,两种柱层析纯化儿茶素单体EGCG,含量可达70%。混合溶剂体系可分离得到68%的EGCG单体,其纯化效果与柱层析接近,而混合溶剂处理量相比柱层析大,且不会因填料吸附而产生儿茶素的损失,低温操作可减少儿茶素变性和溶剂挥发,并可实现连续生产操作。   混合溶剂极性变化采用疏水性常数lgP进行表述,通过lgPmixture x0lp1+x21gP2计算混合溶剂的lgP值。对比乙酸乙酯-石油醚体系,乙醇-石油醚lgP在-0.24-4.0范围呈线性梯度变化。溶剂反应活化能变化显示混合溶剂lgP是儿茶素单体分离的主要影响因素。应用Origin7.5分析软件建立混合溶剂lgP与儿茶素单体浓度变化模型,采用四元三次方程Y=A+Bt*X+B2*X2+B3*X3对EGCG、ECG、CAF进行线性拟合,得出决定系数(COD)>O.8,呈极显著性。   混合溶剂分离儿茶素单体研究,以及溶剂IgP与儿茶素间的模型分析,对离心分离设备进行整合创新,优化改进传动系统、物料输送、温度控制、物料分离,实现混合溶剂分离儿茶素单体的放大生产,并推广至其他天然产物的分离纯化。
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